ToRCH 是一组可以导致严重的先天性缺陷甚至胎儿死亡的感染性疾病的英文首字 母缩写。迈迪安生命科学公司（Meridian Life Science，Inc.）已经开发出一系 列完整的试剂，适用于多种形式的TORCH检测，包括IgG和IgM抗体检测，抗IgM 快速测定和免疫荧光(IFA).
ToRCH IgG/IgM抗体检测试剂研发
www.MeridianBioscience.com/LifeScience
ToRCH概述
ToRCH 是一组可以导致严重的先天性缺陷甚至胎儿死亡的感染性疾病的英文首字 母缩写。迈迪安生命科学公司（Meridian Life Science，Inc.）已经开发出一系 列完整的试剂，适用于多种形式的TORCH检测，包括IgG和IgM抗体检测，抗IgM 快速测定和免疫荧光(IFA).
ToRCH 检测包括检查母婴对于五种病原体的慢性感染的 抗体的水平：弓形虫病，“其他感染”，风疹，巨细胞 病毒和单纯疱疹病毒。“其他感染”通常包括梅毒/乙 肝/柯萨奇病毒/EB病毒/水痘-带状疱疹病毒和人类细小 病毒。 这些感染性疾病都与产妇感染引起胎儿死亡的先天性异 常有关。尽管这些微生物通常只造成被感染的母体无症 状或轻度感染症状，但它们却可以对胎儿造成严重的后 果。 如果孕妇在怀孕前三个月感染并且是初次感染，其造成 先天性遗传疾病的危险性则远远高于二次或重新感染。 巨细胞病毒是造成胎儿先天畸形的最常见的传染病，并 具有高度传染性。母亲的原发感染传染率（10%）相对 于母亲的继发感染率（1%）要高得多。因此在怀孕早期 鉴别这些感染就显得极为重要。
lgM与lgG 血清学时间曲线对比
对于大多数ToRCH病原体，初步筛查是检测该病原体的 抗体。市场上现有的测定方法包括检测IgG抗体，IgM抗 体，或者两者兼有。在多数情况下，IgG抗体阳性而IgM 抗体阴性表示感染发生在过去，而IgM抗体阳性而IgG抗 体阴性则表示近期感染。然而，对于弓形虫和巨细胞病 毒感染，IgG的检测结果被发现对于识别原发性感染也 是有帮助的。有些个体可以在重复感染后产生IgM抗 体，所以IgM阳性并不一定代表原发的感染。此外也已 经证实，在原发性感染最初几个月内产生的IgG抗体相 对于感染数月或数年之后所产生的IgG抗体对抗原具有 较低的亲和力，因此，通过检测低亲和力的IgG抗体可 以特异性的鉴定高风险的母亲所患的原发感染。总之， 为了保护TORCH病原体感染胎儿，进行孕早期筛查早期 诊断是关键。大多数TORCH感染的母亲无症状，但如果 不及时治疗可导致严重的新生儿出生缺陷或者胎儿死亡。
2 | ToRCH 原料 - IgG 和 IgM 检测方法研发
迈迪安公司提供的各种ToRCH抗原及抗体
抗原/抗体
试剂开发原材料
弓形虫 抗-人IgM
Anti-human IgM
8200
天然抗原
Z01235M 单抗 W01258G 山羊(µ 链) W01259G 山羊(µ 链), 与IgA 和IgG轻度交叉反应
R01573 R01581
重组抗原p30 (SAG1), 大肠杆菌
重组抗原p35 (GRA8), 大肠杆菌 C01523M 抗弓形虫SAG1蛋白（p30）单抗 C01589M 抗弓形虫蛋白(38kDa) 单抗
抗-人IgG
Z86238M 单抗(Fc), 与IgA, IgM或IgE无交叉反应
风疹病毒
6075 天然抗原，III级纯化, 最高纯度 6076/6123 天然抗原，IV级纯化, 最高纯度 9600 天然抗原, 最高纯度 R01491 重组抗原，E1 镶嵌, 大肠杆菌 EV9525 纯化单抗 EV9526 纯化单抗
IgG吸收剂 (适用于IgM测定)
L15406G
山羊抗人IgG (Fc)
8120
IgM 稀释液
固相封闭液
J82100B J82300B J16403D
ELISA 封闭液
巨细胞病毒
横向免疫层析含阻断剂的PBS缓冲液 包被稳定剂和阻断剂缓冲液
7511 7600
天然抗原高度纯化用于开发IgM试剂 天 然抗原高度纯化用于开发IgG/IgM 试剂
EV9268 EV7509 R18102 R01561 R01562 R01563
天然抗原II级纯化 天然抗原高度纯化 gB 重组抗原 gB, 大肠杆菌
订购方式
重组抗原pp52 (UL44), 大肠杆菌 重组抗原pp65 (UL83)，大肠杆菌 重组抗原pp150 (UL32), 大肠杆菌
Director of China Business Development: 张亮， 医学博士，博士 亚太地区总监 US Cell: +1 312.405.3022 China Cell: 18810208056 Email: liang.zhang@meridianlifescience.com Meridian Life Science, Inc. 5171 Wilfong Rd. / Memphis, TN 38134 www.MeridianBioscience.com/LifeScience ISO Certified Company
C86314M 抗早期抗原(65kDa蛋白)单抗 C8A022M 抗早期抗原, pp72单抗
一型单纯疱疹病毒
7305 VTI520
天然抗原
重组糖蛋白G1抗原（酿酒酵母菌表达）
C05014MA 抗核衣壳蛋白(155kDa)单抗 C66150M 抗糖蛋白G1单抗
二型单纯疱疹病毒
7705 VTI530
天然抗原
重组糖蛋白G2抗原（酿酒酵母菌表达）
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常用ToRCH检测技术
捕获法检测ToRCH IgG & IgM
ToRCH血清学试验是检测这类传染病（弓形虫，风疹，巨细胞病毒和单纯疱疹病毒）的IgM和IgG抗体。 IgM抗体 是人类接触细菌，病毒或毒素后免疫系统所最先产生的抗体，它在出现后2-3周内消失。随之而产生的IgG抗体则可 长期甚至终生存在于体内。迈迪安公司的ToRCH抗原适合开发各种IgG和IgM检测试剂。它们可以广泛地应用于各 种免疫测定平台，包括酶联免疫吸附，床边快诊，化学发光，快速诊断，和各种基于微粒的技术等等。
可被检测 物质
试验基本原理 1. 固相（测定板，微粒等）之上包被抗原 2. 加入封闭剂缓冲液封闭剩余的结合位点 3. 加入样品，患者样本中的IgG或IgM 抗体与抗原结合 4. 通过直接或间接的方法检测
间接法
底物
酶
二抗
患者标本中的 IgG 或 IgM 抗体
阻断剂
抗原
接法检测: 使用标记的二抗进行检测。二抗具有特异性的抗人IGG或IGM 的特性。
ToRCH 抗-IgM 快速诊断
快速的抗IgM测定对于在疾病的早期表现出的IgM抗体的的检测特别敏感。这些测定方法原理是患者的的样本中的 特异的IgM抗体为固相上包被的抗IgM抗体所捕获。通过加入过量可溶性抗原使得特异性IgM抗体 - 抗原结合，并 且不因为同型免疫球蛋白存在而受到竞争性干扰。最后，加入针对该抗原的标记的特异检测抗体。该方法测定的灵 敏度通常是高度依赖于所使用的抗原的纯度。 IgM抗体酶联免疫吸附捕获法可以减少类风湿因子的干扰。
底物
试验基本原理 1. 固相包被抗-人 IgM抗体（单抗或多 抗）并加入封闭剂缓冲液封闭剩余的 结合位点。 2. 固相包被抗-人 IgM抗体（单抗或多 抗）并加入封闭剂缓冲液封闭剩余的 结合位点。 3. 加入过量的抗原（如风疹病毒，弓形 虫），抗体 - 抗原 - 抗体形成复合物。 4. 通过直接或间接的方法检测。
可被检测 物质
可被检测 物质
酶
抗-ToRCH 抗原 的抗体
从病人标本中俘获 的IgM
ToRCH抗原
抗人IgM 抗体 推荐: Cat# Z01235M Cat# W01258G Cat# W01259G
直接法检测
间接法检测
直接法检测: 使用标记的抗原直接与抗体结合。
间接法检测: 使用标记的二抗进行检测。
4 | ToRCH 原料 - IgG 和 IgM 检测方法研发
怎样提高实验灵敏度
使用固相阻断剂缓冲液
固相阻断剂缓冲液可以用于阻止非特异性结 合，降低本底干扰，稳定包被蛋白，从而有效 提高免疫分析灵敏度。固相阻断剂主要是通过 占据没有被包被的空间表位以防其他非特异性 的蛋白或生物分子结合，从而达到阻断效果。
推荐使用的材料: J82100B ELISA的阻断剂缓冲液 J82300B 横向免疫层析含阻断剂的PBS缓冲液 J16430D 包被稳定剂和阻断剂缓冲液
使用IgG吸附剂去除IgG抗体和类风湿因子的干扰
由于病人样本中含有IgG抗体，致使IgM抗体 检测的灵敏度和特异性受到影响。样本中的 IgG抗体主要通过两种机制对IgM抗体检测造 成干扰，导致错误的检测结果： •通过竞争特异性IgM的结合位点 •通过与类风湿因子（RF）形成的免疫复合物 竞争特异性IgM的结合位点 通过山羊抗人IgG抗体预处理病人样本可以有 加入效地除去IgG和RF-IgM复合体的干扰。
推荐使用的材料: L15406G 山 羊抗人IgG FC (GAHG) 加入病人样本前进行稀释。
推荐稀释比例为1:10，用PBS进行稀释。按照1:10的 比例加入病人样本中，孵育5-30分钟。 IgM 稀释液 取一个单独的反应管，病人血清样本与IgM 稀释液按照1:21或者更高稀释比例（混合均匀） 进行稀释。稀释步骤必须与其他试验步骤一致进行 规范化处理。
8120
怎样使用阻断剂缓冲液和山羊抗人IgG抗体
通用试验程序 步骤 1 优化微孔板/硝酸 纤维素膜捕获（包被）抗原 条件 A．微孔板包被抗原：用碱性缓 冲体系，如磷酸盐缓冲液(pH 7.4)或碳酸盐缓冲液(pH 9.4) 将抗原稀释为2-10 μg/mL工 作浓度； B．将加入工作浓度抗原后的微孔 板在4-37°C孵育几个小时，或 者过夜； C．去除包被缓冲液，洗板，这样 抗原就被固定在微孔板上了。
步骤2 添加阻断剂缓冲液 A. 直接在微孔，印迹膜或硝酸纤维 素膜加入阻断剂溶液（根据实验 的设计）。 使用浓度为1X 或者进一步稀释 ELISA 阻断剂缓冲液: Cat# J82100B 横向免疫层析阻断剂缓冲液: Cat# J82300B 包被稳定剂和阻断剂缓冲液: Cat# J16430D B.室温孵育30分钟-2小时 C. 根据实验要求继续进行后续试 验操作
步骤4 将病人样本复合物加 入到反应孔中 A. 病人样本与捕获（包被）抗原 进行孵育 B. 进行洗涤步骤，去除没有结合 的试剂
步骤3 将病人血清样本中加 入GAHG进行预处理 A. 按照1:10比例用PBS稀释GAH IgG B. 将稀释后的GAH IgG按照1:10比 例加入到病人样本中，并混匀 C. 孵育3-5分钟后进行检验
抗原被包被在微 孔板上，如果病 人样本中含有IgM 抗体，那么该抗 体就会与抗原进 行反应
山羊抗人IgG
含有IgG和IgM 抗体的病人血 清样本
病人样本
病人的血清样本 和GAH IgG预处 理后先加入微孔
GAHG与病人 样本中IgG形 成复合物
步骤5 通过直接法或间接法 进行检测
板上包被抗原
www.MeridianBioscience.com/LifeScience | 5
商业产品试剂 及推荐产品
弓形虫IgM检测
检测类型
固相
抗原
检测系统 推荐原料
雅培 ARCHITECT IgM抗体捕获 夹心法" 西门子 IMMULITE 索林诊断 LIAISON 生物梅里埃 VIDAS
“CMIA IgM抗体捕获夹心法” “MEIA IgM抗体捕获夹心法” “CLIA IgM抗体捕获夹心法” “CLIA IgM抗体捕获夹心法” “ELFA IgM抗体捕获夹心法”
Z01235M, C01523M and R01573
顺磁性微粒 小鼠抗人IgM，抗弓形虫及P30 重组抗原F(ab’)2片断 直接, CL
小鼠抗人IgM，抗P30和天然抗 原单抗
微粒
间接, MUB Z01235M, C01523M and 8200
Z01235M, C01523M and 8200 Z01235M, C01523M and 8200
顺磁性微粒 小鼠抗人IgM，抗弓形虫和P30 单抗 直接, CL 顺磁性微粒 小鼠抗人IgM，抗P30和天然抗 原单抗 间接, CL
固相配合 羊抗人IgM，抗P30和天然抗原 单抗 直接, MUB W01259G, C01523M and 8200
弓形虫IgG检测
检测类型
固相
抗原
检测系统 推荐原料
雅培 ARCHITECT CMIA
R01573, R01581 and Z86238M R01573, R01581 and Z86238M
顺磁性微粒 30和P35（GRA8）重组抗原， 抗 - 人IgG 间接, CL
雅培 ARCHITECT Avidity
CMIA 两种检测方法：含有和没有封 闭剂以祛除低亲和力抗体
顺磁性微粒 30和P35（GRA8）重组抗原， 抗 - 人IgG 间接, CL
西门子 AVIDA Centaur 西门子 IMMULITE 2000
CLIA
顺磁性微粒 天然 p30抗原
直接, CL
8200
CLIA
顺磁性微粒 部分纯化的抗原，小鼠抗人 IgG
间接, CL
8200
索林诊断 LIAISON CLIA
顺磁性微粒 天然抗原，抗 - 人IgG
间接, CL
8200 and Z86238M
索林诊断 LIAISON Avidity
CLIA 两种检测方法：含有和没有6摩 尔浓度的尿素以祛除低亲和力抗体 顺磁性微粒 天然抗原，抗 - 人IgG
间接, CL
8200 and Z86238M
生物梅里埃 VIDAS 生物梅里埃 VIDAS Avidity
ELFA
固相配合 天然抗原
直接, MUB 8200
ELFA 两种检测方法（对照和检测） ：含有和没有分离洗涤步骤以祛除低 亲和力抗体
固相配合 天然抗原（RH沙宾株），抗 - 人IgG 直接, CL
8200 and Z86238M
ELFA: CLIA:
酶联荧光法
化学发光法 CMIA: 微粒子化学发光免疫分析 MUB: Methyl-umbellifery CL: 化学发光 MEIA: 微粒子酶免疫 ECLIA: 电化学发光免疫分析
6 | ToRCH REAGENTS - IgG and IgM Assay Development
风疹病毒IgM检测
检测类型
固相
抗原
检测系统 推荐原料
雅培 ARCHITECT i2000SR
CMIA
顺磁性微粒 病毒裂解物（HPV77株）和小 鼠抗 - 人IgM单克隆抗体 间接, CL
6076/6123 or 9600
重组风疹病毒样颗粒和风疹病 毒特异性抗体
R01491 and EV9525 or EV9526
罗氏 ELECSYS CLIA IgM-俘获夹心法
磁微粒
间接, CL
西门子 IMMULITE 2000
CLIA IgM-俘获夹心法
聚苯乙烯珠 病毒裂解物（HPV77株） 间接, CL
6076/6123 or 9600
西门子 AVIDA Centaur XP
6076/6123 or 9600 and EV9525 or EV9526
CLIA IgM-俘获夹心法
顺磁性微粒 风疹病毒裂解物和风疹病毒特 异性抗体 间接, CL
风疹病毒IgG检测
检测类型
固相
抗原
检测系统 推荐原料
雅培 ARCHITECT i200SR
CMIA
顺磁性微粒 部分纯化的裂解物（HPV77 株），小鼠抗人IgG
间接, CL
6075 and Z86238M
雅培 AxSYM MEIA
顺磁性微粒 纯化的裂解物及小鼠抗人IgG 间接, MUB 6075 and Z86238M
西门子 AVIDA Centaur XP
CLIA 简易
顺磁性微粒 部分纯化的裂解物（HPV77 株），小鼠抗人IgG
间接, CL
6075 and Z86238M
西门子 IMMULITE 2000
CLIA 简易
顺磁性微粒 裂解物
间接, CL
6075
贝克曼 ACCESS 2 EIA
顺磁性微粒 裂解物
间接, CL
6075
重组E1抗原，风疹病毒样颗粒 和风疹病毒特异抗体
R01491 and EV9525 or EV9526
罗氏 ELECSYS CLIA, G-捕获方法双抗原夹心 磁微粒
间接, CL
生物梅里埃 VIDAS Ortho VITROS Eci
ELFA, 免疫夹心法
固相配合 病毒裂解物（MR383株），抗 人IgG 间接, MUB 6075 and Z86238M
病毒裂解物（MR383株），抗 人IgG
CLIA 高度复杂
Plastic wells
间接, 发光 6075 and Z86238M
巨细胞病毒IgM检测
检测类型
固相
抗原
检测系统 推荐原料
病毒裂解物（AD169株），重 组抗原pp150 和 pp52，抗人 IgM 重组抗原pp150 ， pp52 ，pp38和抗人IgM
雅培 ARCHITECT CMIA
R01561, R01563 and W01259G R01561, R01562, R01563, R01567 and W01259G 7600 or 7511 and W01259G and L15406G R01561, R01563 and Z01235M
顺磁性微粒
间接, CL
雅培 AxSYM MEIA
微粒
间接, MUB
西门子 IMMULITE 2000
CLIA 3 步法, IgM-俘获夹心法 顺磁性微粒 纯化抗原（AD169株），羊抗 人IgG，羊抗 - 人IgM 直接, CL
罗氏 ELECSYS ECLIA IgM-俘获夹心法
顺磁性微粒 重组抗原pp150 ， pp52和抗 人IgM 直接, CL
生物梅里埃 VIDAS
ELFA IgM-俘获夹心法
固相配合 病毒裂解物（AD169株），小 鼠抗人IgM 间接, MUB 7600 or 7511 and Z01235M
www.MeridianBioscience.com/LifeScience | 7
商业产品试剂 及推荐产品
巨细胞病毒IgG检测
检测类型
固相
抗原
检测系统 推荐原料
雅培 ARCHITECT I2000SR 雅培 ARCHITECT Avidity
CMIA
顺磁性微粒 病毒裂解物
间接, CL
7600 or 7511
CMIA, 两种检测方法：含有和没有 液态CMV抗原以中和高亲和力的 CMV抗体
7600 or 7511 and Z86238M
顺磁性微粒 病毒裂解物，抗人IgG
间接, CL
雅培 AxSYM MEIA 西门子 IMMULITE 2000 CLIA
微粒
病毒裂解物
间接, MUB 7600 or 7511
顺磁性微粒 纯化抗原
间接, CL
7600 or 7511
罗氏 ELECSYS ECLIA, 一步双夹心法
顺磁性微粒 重组抗原pp150 ， pp52 ，pp28，pp38
直接, CL
R01561 or R01563
罗氏 ELECSYS Avidity
ECLIA, 两种检测方法：含有和没有 分离液以祛除低亲和力抗体 顺磁性微粒
重组抗原pp150 ， pp52 ，pp28，pp38
直接, CL
R01561 or R01563
生物梅里埃 VIDAS
ELFA 两步夹心法
固相配合 病毒裂解物，抗人IgG
直接, MUB 7600 or 7511 and Z86238M
ELFA 两种检测方法：含有和没有6 摩尔浓度的尿素以祛除低亲和力抗 体
生物梅里埃 VIDAS Avidity
固相配合 病毒裂解物，抗人IgG
直接, MUB 7600 or 7511 and Z86238M
单纯疱疹病毒1型和2型IgG/IgM检测
检测类型
固相
抗原
检测系统 推荐原料
索林诊断 LIAISON HSV-1 Type Specific 索林诊断 LIAISON HSV-2 Type Specific Focus PLEXUS HerpesSelect® 1 and 2 lgG Biorad BIOPLEX 2200 HSV-1 & HSV-2 IgG
重组抗原HSV-1 gG 1，小鼠抗 人IgG 重组抗原HSV-1 gG 2，小鼠抗 人IgG 重组抗原HSV-1 gG 1，HSV-2 gG2，羊抗人IgG 重组GG1，从gG2序列（专 利）派生的p8C：BSA合成多 肽和鼠抗人的lgG，鼠抗人FXlll
CLIA, 两步法
磁微粒
间接, CL
VT1520, Z86238M
CLIA, 两步法
磁微粒
间接, CL
VT1530, Z86238M
VT1520, VT1530 and L15406G VT1520, VT1530 and Z86238M
EIA 三步复流
微粒
间接, 荧光
EIA 三步复流
羧基包被染色珠
直接, 荧光
罗氏 ELECSYS HSV-1 lgG ECLIA, 两步双抗原夹心法
顺磁性微粒 重组 HSV-1 和HSV-1 病毒裂解 物 直接, CL
VT1520 and 7305
西门子 Immunlite 2000 Herpes 1/2 lgG
7305, 7705 and Z86238M
CLIA
顺磁性微粒 HSV-1 (MacIntyre株) 和HSV-2 (G株)裂解物，抗人IgG 间接, CL
Life Science Division 5171 Wilfong Road | Memphis, TN 38134 901.382.8716 • 800.327.6299 www.MeridianBioscience.com/LifeScience
06/18
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