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外，经常需要重复活检，而每次手术都有严重 感染和住院的风险。 PCA3于1995年首次被发现，是一种前列腺特 异性的非蛋白编码RNA，在前列腺癌中过量表 达，与前列腺体积和/或其他前列腺疾病（如 前列腺炎）无关。几项研究表明，PCA3可以 作为前列腺癌的预后标记物，特别是与其他预 测标记物结合使用时，PCA3尿液定量检测已 被引入临床实践 12 。 在以下研究中，使用了迈迪安 Air-Dryable™ 可风干尿液直扩RT-qPCR预混液（MDX151）
对5% DNA酶处理的人体尿液样本中10倍 连续稀释的RNA靶标（分别为10,000， 1,000，100和10个拷贝）和已知浓度的长非 编码RNA靶标（PCA3）进行扩增。反应 QuantStudio 扩增仪上进行，扩增程序为 50°C 10分钟；95°C 3分钟；95°C 10 秒，60°C 25秒，50个循环（图5）。结果显 示，Air-Dryable™ 可风干尿液直扩RT-qPCR 预混液对人体尿液中的PSA3有超强的检测灵 敏度 12 。 Minimal residual disease （MRD） 除了早期癌症筛查外，另一个重点研究领域就 是治疗后的疾病监测，以寻找最小残留疾病 （MRD），即癌细胞在治疗后仍存在于体 内。这些细胞低于成像研究的分辨率和检测水 平，被认为是癌症复发的主要原因。 目前液体活检用于MRD的概念在白血病中相 对较成熟，通过越来越灵敏的采样技术使临床 医生能够检测到越来越低水平的MRD。此 外，由于肿瘤细胞的可及性有限，与血液系统 恶性肿瘤相比，实体肿瘤监测一直具有挑战 性，而如今随着液体活检检测的灵敏度和特异 性的提高，也成为可能。 结论 液体活检正在彻底改变临床肿瘤学领域，为 更便利的肿瘤取样，通过重复取样进行持续 监测，对治疗耐药性的筛查，并为制定个性 化治疗方案提供机会。虽然这项技术仍在不 断发展，但其非侵入性的优势有望开启临床 肿瘤学的新时代。随着qPCR灵敏度和可重复 性方面的局限性被克服，针对液体活检相关 的挑战也有了解决方案。使用粗样本来提高 灵敏度，降低检测的复杂性和成本就是一种 有效的解决方案，它可以更容易地和临床甚 至护理点检测相整合，为改善临床结果和与 癌症治疗相关的医疗支出提供了更多机会。
图 5. 对5% DNA酶处理的人体尿液样本中前列腺癌 抗原3 （PCA3） 检测最低可至低于10拷贝 RNA靶标
图 5: 前列腺癌抗原3 （PCA3）是一种长链非编码 RNA，也称为DD3，位于9号染色体的长臂上，在前 列腺癌组织中的表达水平高于邻近的非癌组织，而 在正常组织和其他前列腺相关疾病中未见表达水 平。PCA3的这种特异性使其成为前列腺癌的理想生 物标志物，因为它不会像其他生物标志物那样受患 者年龄、前列腺炎症、前列腺体积或创伤等因素影 响。本检测中使用了迈迪安 Air-Dryable™ 可风干尿 液直扩RT-qPCR预混液（MDX151， 橙色 ）对5% DNA酶处理的人体尿液样本中10倍连续稀释的RNA 靶标（分别为10,000，1,000，100和10个拷贝）和 已知浓度的长非编码RNA靶标（PCA3）进行扩增。 反应QuantStudio 扩增仪上进行，扩增程序为50°C 10分钟；95°C 3分钟；95°C 10秒，60°C 25秒，50 个循环（图5）。结果显示，Air-Dryable™ 可风干 尿液直扩RT-qPCR预混液对人体尿液中的PCA3有超 强的检测灵敏度。
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