，
B）
qPCR反应设置：5 μL，4x 预混液（MDX131 MDX095或对比试剂），1 μL引物探针混合 物 4 μL DEPC 水及 5 μL提取的RNA模板或粗 裂解液。qPCR扩增设置：逆转录 55°C x 10 分钟，95°C x 3分钟，（95°C x 10秒， 60°Cx45秒，69°Cx20秒）x46个循环。 结果： 对提取的RNA和唾液粗裂解液样本的扩增 中，Air-Dryable™ 可风干唾液直扩RT-qPCR 预混液（MDX131）的Ct值比Air-Dryable™ 可风干一步法RT-qPCR预混液（MDX095） 和对比试剂更提前。这表明MDX131对唾液 中存在的抑制物，包括提取的RNA中残留的 抑制物，比其他预混液有更强的耐受能力。 无论是直接扩增还是扩增还是提取的RNA， Air-Dryable™ 可风干唾液直扩RT-qPCR预混 液（MDX131）是超灵敏唾液POC检测的理 想选择。
研究 1 目标：
比较Air-Dryable™ 可风干唾液直扩RT-qPCR 预混液（MDX131）、Air-Dryable™ 可风干 一步法 RT-qPCR预混液（MDX095）及对比 试剂在多重检测中检测SARS-CoV-2 RNA的 性能（靶点：ORF1ab（FAM），N蛋白 （ROX）和GAPDH内参（Cy5））。 新冠患者体内提取的唾液经RNA提取或粗裂 解处理样本，取半数组织培养感染剂量 （TCID50）为1000拷贝/毫升为模板进行 扩增。 方法： 从SARS-CoV-2病毒感染患者体内提取的唾 液样本经过RNA 提取或简单裂解液处理 （50 μL 唾液样本加入 50 μL裂解液后在 95°C加热5分钟，经过11,000 rpm 涡旋1分 钟取上清液）。
A）
提取或粗裂解唾液样本中的SARS-CoV-2 检测
50
40
30
20
10
0
FAM
ROX
CY5
FAM
ROX
提取的RNA
粗裂解液
MDX095 | MDX131 | Reference Mix
Figure 1. 使用Air-Dryable™ 可风干唾液直扩RT-qPCR预混液（MDX131），Air-Dryable™ 可风干一步法 RT-qPCR预混液（MDX095）及对比试剂分别对唾液样本中提取的RNA模板和唾液粗裂解液进行扩增检测 SARS-CoV-2。（A）平均Ct值对比柱形图（B）对应的扩增曲线图。对提取的RNA和粗裂解样本的扩增 中，MDX131在FAM，ROX和Cy5三个通道中的扩增都比MDX095和对比试剂更快。
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