Meridian Detection of SARS white paper - Chinese

样本

样本准备 1 IFB-1-1 磁珠纯化提取的Flu B样本稀释至10 3 倍 1 IFB-1-2 磁珠纯化提取的Flu B样本稀释至10 4 倍 2 IFB-2-1 人体唾液稀释10 3 倍的Flu B 样本，用存储缓冲液#1处理 2 IFB-2-2 人体唾液稀释10 4 倍的Flu B 样本，用存储缓冲液#1处理 3 IFB-3-1 人体唾液稀释10 3 倍的Flu B 样本，用存储缓冲液#2处理 3 IFB-3-2 人体唾液稀释10 4 倍的Flu B 样本，用存储缓冲液#2处理 4 IFB-4-1 人体唾液稀释10 3 倍的Flu B 样本，用裂解液#1处理 4 IFB-4-2 人体唾液稀释10 4 倍的Flu B 样本，用裂解液#1处理 5 IFB-5-1 人体唾液稀释10 3 倍的Flu B 样本，用裂解液#2处理 5 IFB-5-2 人体唾液稀释10 4 倍的Flu B 样本，用裂解液#2处理 NC DEPC 水

研究 2：

目标：比较Air-Dryable™ 唾液直扩RT-qPCR预混液（MDX131）与 Air-Dryable™ 一步法RT-qPCR预混液（MDX095）风干和液体体系对唾液样本中Flu B的扩增。方法： FluB样本或采用磁珠法提取RNA（样本IFB-1），或分别使用100μL 的存储缓冲#1（样本IFB-2）、存储缓冲液#2（样本IFB-3）、裂解液#1（样本IFB-4）或裂解液#2（样本IFB-5）进行处理。然后这些样本快速涡旋上清液，用健康的人体唾液将Flu B样本稀释至10 3 或 10 4 倍（见表1）。标准循环：逆转录 55°C x 10 分钟，95°C x 3 分钟，（95°C x 10 秒，60°C x 60 秒）x 5 个循环，（95°C x 10 秒，60°C x 30秒）x 40个循环）。快速循环：逆转录 55°C x 5 分钟，95°C x 1 分钟，（95°C x 1 秒，60°C x 15 秒）x 5 个循环，（95°C x 1秒，60°C x 15秒）x 38个循环。

表1. 分别使用Air-Dryable™ 可风干唾液直扩RT-qPCR预混液（MDX131）和Air- Dryable™ 可风干一步法RT-qPCR预混液（MDX095）对人体唾液样本中的Flu B进行检测。表中描述了不同样本的处理方法。

A. 标准循环

10 15 20 25 30 40 35

0 5

IFB-1-1 IFB-1-2

IFB-2-2 IFB-3-1 IFB-3-2 IFB-5-1 IFB-5-2 IFB-NC IFB-NC IFB-2-1

样本

B. 快速循环

10 15 20 25 30 40 35

0 5

IFB-1-1 IFB-1-2

IFB-2-2 IFB-3-1 IFB-3-2 IFB-5-1 IFB-5-2 IFB-NC IFB-NC IFB-2-1

样本

Air Dried（MDX095） | Wet（MDX095） | Air Dried（MDX131） | Wet（MDX131）| Reference Mix

表2. 使用Air-Dryable™ 可风干唾液直扩RT-qPCR预混液（MDX131）和Air-Dryable™ 可风干一步法RT-qPCR预混液（MDX095）对人体唾液样本中提取的Flu B RNA或粗裂解液中的Flu B进行检测：（A）标准循环（B）快速循环。两种反应循环设置中，风干的MDX131检测效率最高，其次依次是MDX131的液体体系， MDX095的液体体系和风干体系，最后是对照试剂。