可风干植物直扩qPCR预混液（Air-Dryable™Direct DNA qPCR Plant）是一种无甘油、 抗抑性的预混液，专门为开发从植物样本中免核酸提取、进行DNA直扩的常温稳定型检 测设计的一款qPCR试剂。
可风干植物直扩 qPCR预混液 专为植物样本直接扩增， 常温稳定型检测设计
可风干植物直扩qPCR预混液（Air-Dryable™Direct DNA qPCR Plant）是一种无甘油、 抗抑性的预混液，专门为开发从植物样本中免核酸提取、进行DNA直扩的常温稳定型检 测设计的一款qPCR试剂。 在过去20年里，随着转基因生物(GMO)的引入，对更精确可靠地检测食用植物中的外源(转基因或致病)DNA的要求越来 越高，这驱动了qPCR技术在植物研究中的运用。从植物样品中直接扩增DNA是一种快速、方便的方法，可避免繁琐耗时的 核酸提取步骤。但由于植物广泛多样性的原因，直扩检测的一致性和灵敏度是一个挑战。不同植物品种细胞壁 结构和成分不同是影响qPCR直扩成功与否的主要挑战。除此之外，细胞裂解后，DNA释放易于扩增，但细胞内的代谢 产物和所有组分也同时被释放，从而也同样会引起扩增抑制的问题。可风干植物直扩qPCR预混液是市面上首款用于开 发常温稳定的植物DNA直扩的产品。它结合了抗抑性和可风干的优势，为开发高灵敏度，低成本的植物检测提供了理想 的解决方案。一小块植物叶片在SDS裂解液、碱性裂解液或水中加热裂解后直接加入风干的反应预混液中即可进行扩增反 应，获得高灵敏度和可重复性的检测结果。
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL 1,000 个反应 50 mL 10,000 个反应
可风干植物直扩 qPCR预混液，4x
MDX116
产品亮点
适用于从植物裂解液中直接进行DNA扩增
将一片番茄叶穿孔样本分别加入 (A) 26 μL 0.1% SDS 裂解液和 (B) 碱性裂解液（20 μL 0.2M NaOH +6 μL 2M Tris-HCl, pH 7.5）在95 °C加热5分钟裂解。 分别使用干燥前后的可风干植物直扩qPCR预混液对 含有5%和25%的植物裂解液直接进行扩增，检测番 茄Hsp21基因，对比预混液干燥前后的扩增性能。 左图：使用SDS裂解液，棕色为湿液扩增曲线， 橙色为使用干燥预混液的扩增曲线。 右图：使用碱性裂解液，绿色为湿液扩增曲线， 橙色为使用干燥预混液的扩增曲线。 结果表明，可风干植物qPCR预混液在干燥前后均能 从使用不同裂解液的植物裂解样本中进行高效扩增。
可风干植物qPCR预混液在干燥前后均能从使用不同裂解液的植物裂解样本中进 行高效扩增。
A) 湿液 vs.干燥后 - SDS 裂解液
B) 湿液 vs.干燥后 - 碱性裂解液
25%
25%
5%
5%
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对低量污染物的高灵敏度识别
最低可检测出番茄裂解液样本中1个拷贝的水稻ATPe 基因，并达到100%的扩增
在可风干植物直扩qPCR预混液中加入水稻 ATPe引物和探针，然后将混合物进行风干。 分别向40%的番茄叶碱性裂解液中加入1000 拷贝( 棕色 )、100拷贝( 橙色 )、10拷贝( 绿色 ) 和1拷贝( 蓝色 )的水稻基因组DNA，然后用 该样本复溶风干的反应混合物，直接进行 qPCR扩增。 结果显示，可风干植物直扩 qPCR预混液最低可以检测到番茄裂解液样 本中1个拷贝的水稻ATPe ，并且达到100% 的扩增。
A) 扩增曲线
B) 标准曲线
与简单、直接的操作流程兼容
将单个番茄叶穿孔样本加入20μL水 中，95°C加热5分钟后，将样本粗裂解液 添加到风干后的可风干植物直扩qPCR预混 液（含有ARF2引物和探针）中。蓝色曲线 为使用液体qPCR试剂对番茄基因组DNA的 标准扩增曲线，棕色曲线为使用干燥后的可 风干植物直扩qPCR预混液对番茄裂解液的 直扩曲线，以标准曲线为参考，结果显示 直扩检测可以从单个叶穿孔样本中检测出大 约84个DNA拷贝。该检测显示了可风干植 物直扩qPCR预混液具有较高的扩增性能和 可重复性。
多重检测中高度重现性的稳健扩增
从25%番茄叶碱性裂解样本中直接扩增Hsp21,水稻ATPe 和qPCR 提取内控
将水稻ATPe基因(每反应100个拷贝)和qPCR提取内控DNA (MDX027)添加到25%的番茄叶碱性裂解液中，然后用来复溶干燥 的可风干植物直扩qPCR预混液，对番茄Hsp21基因( 棕色 )、水稻 ATPe( 绿色 )和qPCR提取内控DNA( 橙色 )直接进行扩增，每个样本 均有12个重复。结果显示了可风干植物直扩qPCR预混液在多重 反应中的高度重现性。
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