Meridian is a primary manufacturer of specialized high-quality molecular reagents and offers solutions to a wide range of industries to diagnose and treat diseases, discover new therapeutics or develop tests for environmental, food and cosmetic safety.
开发高性能等温扩增的 尖端分子原料
用于LAMP & NASBA检测的酶、预混液及其他试剂
www.MeridianLifeScience.com
等温扩增技术彻底改变了Point-of-Care (POC) 领域，为更快、更便捷的诊断铺平 了道路。
在Meridian Bioscience迈迪安生物科技，我们致力于开发超灵敏、高特异和更快速的 分子酶和预混液，以支持新一代灵敏、价廉的 POC 和高通量分子诊断检测。
等温扩增（包括HAD、MCA、NASBA和LAMP）是一种恒温DNA扩增技术，在分子诊断中发挥着越来越重要的作用。与qPCR相比，等温扩增具 有快速、可兼容低耗能设备的优势，因此特别适合现场场景的诊断。等温扩增技术已被广泛应用，包括检测沙门氏菌和疟疾等病原体、转基因 作物污染以及法医检测等。 等温扩增
等温扩增中影响检测性能的 4 大关键因素：
• 速度： 缩短检出结果时间（TTR），提高检测通量。 • 灵敏度： 可以扩增低量的DNA/RNA模板。 • 抗抑性： 对抑制物具有强耐受性能的酶，有助于提高对临床样本检测的稳健性和可靠性。 • 兼容性： 对缓冲液中的各组分进行优化，可最大限度地提高检测效率和灵敏度。为了与冻干兼容，需要在不含甘油的条件下对检测体系的化 学成分进行仔细优化，同时还需要考虑到辅料和稳定剂，以确保酶的性能在干燥过程中不受到影响。
环介导等温扩增（LAMP）是最常用的等温扩增方法之一。不过，基于核酸序列的扩增（NASBA）等替代技术现在也越来越受欢迎，其优点是在 较低温度下（通常在41°C左右）直接扩增RNA，无需热循环仪或单独的逆转录步骤。与需要4 - 6个引物的LAMP反应不同，NASBA反应只使用两 个引物，因此引物设计不那么复杂，也更容易优化。迈迪安为开发LAMP和NASBA等温扩增提供了最先进的解决方案，推动了分子检测的发展。
1°C <1小时 简单 2 T7 RNA聚合酶，AMV逆转录酶，RNA酶H 逆转录 T7 RNA聚合酶，AMV逆转录酶，RNA酶H RNA mRNA，ncRNA，病毒RNA检测
60 - 65°C <1小时
反应温度 反应时间 引物设计复杂程度 需要优化的引物数量
复杂 4 - 6 Bst DNA聚合酶（RT-LAMP额外需要逆转录酶） 链置换 依赖Bst酶的链置换活性 DNA/RNA 或 cDNA 病原体检测（细菌、病毒或寄生虫）和基因突变
需要的酶 扩增方法 模板延伸原理
检测靶标 适用应用
LAMP
快速等温扩增DNA的可靠技术
环介导等温扩增（LAMP）使用4-6个引物，可识别目标DNA中的几个特定区域。反应由具有链置换活性的聚合酶（如Bst DNA 聚合酶）和两个专 门设计的引物启动，形成环状结构，以促进后续几轮扩增，产生大量DNA。LAMP反应非常稳健，对抑制物的耐受性较强，可在短时间内产生大 量的DNA（肉眼可见的沉淀或颜色变化）。一般来说，1到10个拷贝的DNA可在一小时内扩增到10 9 到10 10 个拷贝，检测结果较灵敏特异。
正向内部引物
LAMP 反应过程
*RT-LAMP 反应首先需要经过逆 转录步骤从RNA模板生成DNA
“
反向内部引物
LAMP是检测病原体（细菌、病 毒和寄生虫）和基因突变的理想 技术；RT-LAMP还可用于病毒 RNA检测。 ”
指数扩增
迈迪安Bst聚合酶 & LAMP预混液
迈迪安提供的Bst聚合酶专为高效的等温扩增检测而设计，可作为独立的酶或预优化的预混液提供，为开发检测提供最大的灵活性。此外，无甘 油配方与抑制性缓冲液相结合，尤其适用于开发免除核酸提取的直接扩增，可提高检测的稳健性。 为了进一步提高检测耐受性，同时简化检测开发，迈迪安开发了Specimen-specific™ 特定样本类型的抗抑性LAMP预混液，用于对富含抑制物的 样本或样本粗裂解液进行直接扩增。此外，这些预混液既可以用于液体体系，也可以通过冻干或风干干燥用于开发常温稳定的检测。干燥的体系 不仅更适合用于POC平台，而且能最大限度地提高反应的加样量，从而提高检测的LOD。 迈迪安这一系列创新的即用型LAMP预混液更易于检测的优化，全面加速检测研发，是开发超灵敏、快速和简单检测的理想选择，可提升研发的 竞争优势，在快速增长的POCT诊断市场上更快速地占据一席之地。
www.meridianbioscience.com/lifescience
LAMP
快速： 检测细菌和病毒靶标更高特异性和更快速
灵敏度： 超强灵敏度和可重复性，TTR更快，NTC更延后
60
60
50
50
40
40
30
30
20
20
10
10
0
0
NTC
NTC
NTC
NTC
NTC
样本
样本
样本
样本
样本
NTC
NTC
NTC
NTC
NTC
样本
样本
样本
样本
样本
肺炎支原体
HBV
HSV2
EBV
毛滴虫
HCV
HIV-1
DENGUE 1
WNV
Zika
Meridian 冻干体系 | NEB WarmStart ® | Thermo SuperScript ™
分别使用Lyo-Ready™ 可冻干血液直扩LAMP预混液（MDX124， 蓝色 ）与 NEB WarmStart™ LAMP（ 灰色 ）和 Thermo SuperScript™ IV RT-LAMP Master Mix （ 黄色 ）针对血液样本中的五个不同靶标进行直接扩增比较其扩增性能。误差条代表 三个技术重复的标准偏差。更多详细信息，请参阅产品彩页。
分别使用Lyo-Ready™可冻干尿液直扩LAMP预混液（MDX154， 蓝色 ）与 NEBWarmStart™ LAMP（ 灰色 ）和 Thermo SuperScript™ IV RT-LAMP Master Mix（ 黄色 ）针对尿液样本中的五个不同的DNA/RNA靶标进行直接扩增比较其扩增性 能。误差条代表三个技术重复的标准偏差。更多详细信息，请参阅产品彩页。
抗抑性： 对唾液、痰液或含有UTM的样本具有强抑制物耐 受性和快速扩增性能
兼容性： 兼容冻干且在灵敏度和扩增速度上不受任何影响
ADV
HSV2
50
70 60 50 40 30 20 10 0
70 60 50 40 30 20 10 0
40
30
20
10
0
1000 个拷贝 /rxn
500 个拷贝 /rxn
100 个拷贝 /rxn 10 个拷贝 /rxn
无抑 制物
30% 唾液
30% UTM+ 痰液
无抑 制物
30% 唾液
30% UTM+ 痰液
30% VTM
NTC
30% VTM
NTC
Meridian 冻干MDX134 | NEB WarmStart®
Meridian 冻干MDX118 | Meridian Air-dried | NEB WarmStart®
分别使用Lyo-Ready™可冻干唾液直扩LAMP预混液（MDX134， 蓝色 ）与 NEB WarmStart™ LAMP（ 橙色 ）对含有不同抑制物的呼吸道样本中灭活的ADV或HSV-2 病毒进行直接扩增比较其扩增性能。误差条代表四个技术重复的标准偏差。更多详细 信息，请参阅产品彩页。
使用Air- Dryable™ 可风干RT-LAMP预混液（MDX118）扩增1,000、500、100和10 个拷贝的Emesvirus（MS2），分别比较了MDX118的风干体系（ 红色 ）、液体体系 （ 蓝色 ）或NEB WarmStart™（ 橙色 ）。误差条代表4个技术重复的标准偏差。更多 详细信息，请参阅产品宣传页。
NASBA
开发等温扩增、低温循环和低浓度RNA检测的首选
基于核酸序列的扩增（Nuclear acid sequence-based amplification，NASBA）是另一种等温扩增方法，能直接扩增检测RNA靶标。NASBA技术具 有快速扩增、高灵敏度和高特异性的特点，不仅在临床病毒学中特别有用，在便携性至关重要的 POC 应用中也非常有用。 NASBA使用两个靶标特异性引物，即“有义“和“反义“引物，其中一个引物含有T7 RNA聚合酶的启动子序列。RNA反转录为cDNA形成cDNA-RNA 杂交链，随后其中的RNA链被RNase H水解，在AMV逆转录酶的作用下生成dsDNA。该dsDNA被 T7 RNA 聚合酶转录为RNA，并产生指数扩增。 NASBA反应过程
带有T7启动子的引物（P1）
指数扩增
RNA靶标
扩增的RNA靶标
“
AMV逆转录酶
T7 RNA聚合酶
NASBA非常适合在恒定和较低 温度下直接对RNA进行高特异 性扩增，是检测极低浓度RNA 的理想之选，如病毒载量的定量 或RNA病毒的早期检测。 ”
cDNA
RNA
dsDNA
RNase H
AMV逆转录酶
cDNA
cDNA
非T7引物（P2）
依靠逆转录酶的 DNA聚合酶活性
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迈迪安的NASBA检测解决方案 迈迪安提供的NASBA分子酶专为等温扩增检测而设计，以高浓度供应，使检测设计更加灵活。其无甘油的配方性能优越，并兼容冻干，可以干燥后 常温储运，或者满足开发微型化平台的需求，因此特别适用于微流控卡壳检测。 NASBA反应由反转录酶、T7 RNA聚合酶、RNase H酶和两个寡核苷酸引物组成。扩增产物通过分子信标探针检测，因此反应具有RNA具有高度特异 性，并能形成稳定的杂交链。NASBA检测技术非常灵敏，是临床诊断，尤其是传染病诊断的理想选择。 NASBA
快速： 迈迪安的NASBA酶检测具有高特异性，1小时内高特异地检测到靶标，并且无非特异扩增
HIV-1 RNA
使用无甘油T7 RNA聚合酶（HC）（MDX201）、无甘油RNase H（HC） （MDX202）和AMV逆转录酶，在NASBA反应中对1,000个拷贝的HIV-1 RNA靶标进 行扩增。
HIV-1 RNA | NTC
灵敏度： 使用迈迪安的NASBA酶进行灵敏检测，对最低10个拷贝的RNA靶标可在1小时内完成高效扩增
SARS-CoV 2 RNA
HIV-1 RNA
0 10 20 30 40 50
0 10 20 30 40
1000 copies 100 copies 1,000个拷贝 100个拷贝
10 copies 10个拷贝
1000 copies 100 copies 1,000个拷贝 100个拷贝
10 copies 10个拷贝
在NASBA反应中分别对1,000、100和10个拷贝的HIV RNA靶标序列进行高效扩增。结果显示NASBA检测 具有很高的灵敏度，每个反应可在1小时内检测到10个拷贝。这种检测 具有高度特异性、灵敏性和一致性，使NASBA成为下一代分子POC检测的理想技术。
订购信息 LAMP 预混液 & 酶
产品
产品编号
体积
反应数
即用型预混液
5 mL
800 个反应
Air-Dryable ™ 可风干 LAMP & RT-LAMP 预混液， 4X
MDX119 & MDX118
50 mL
8,000 个反应
5 mL
800 个反应
Lyo-Ready ™ 可冻干 LAMP & RT-LAMP 预混液， 4X
MDX097 & MDX108
50 mL
8,000 个反应
5 mL
800 个反应
Lyo-Ready ™ 可冻干血液直扩 LAMP & RT-LAMP 预混液， 4x
MDX124 & MDX125
50 mL
8,000 个反应
5 mL
800 个反应
Lyo-Ready ™ 可冻干唾液直扩 LAMP & RT-LAMP 预混液， 4x
MDX134 & MDX135
50 mL
8,000 个反应
5 mL
800 个反应
Lyo-Ready ™ 可冻干粪便直 LAMP & RT-LAMP 预混液， 4x
MDX144 & MDX145
50 mL
8,000 个反应
5 mL
800 个反应
Lyo-Ready ™ 可冻干尿液直扩 LAMP & RT-LAMP 预混液， 4x
MDX154 & MDX155
50 mL
8,000 个反应
酶
1 mL
8,000 个单位
Bst DNA 聚合酶 (8U/ μ L)
MDX012
20 mL
160,000 个单位
80 μ L
8,000 个单位
高浓度无甘油Bst聚合酶 (100U/ μ L)
MDX018
800 μ L
80,000 个单位
* 酶稀释缓冲液（MDX078），Bst反应缓冲液（MDX076）和抗抑性Bst反应缓冲液（MDX019）也可单独提供。 具体详情请参考Bst酶的产品说明书。
NASBA 酶
产品
产品编号
体积
反应数
50 μ L 50,000 个单位 500 μ L 500,000 个单位
无甘油T7 RNA聚合酶 (HC, 1,000 U/uL)
MDX201
50 μ L
2,500 个单位 12,500 个单位
无甘油RNase H (HC, 50 U/uL)
MDX202
250 μ L
无甘油AMV逆转录酶 (HC)
MDX209
Coming soon
支持产品 MMLV-RT 55C MMLV-RT RNA 酶抑制剂
MDX044 MDX1 17 MDX056 MDX051 MDX058
VLP-RNA Extraction Control Red MDX068 VLP-RNA Extraction Control Orange MDX069 qPCR Extraction Control Red MDX026 qPCR Extraction Control Orange MDX027
dNTP Mix, 100mM （锂盐） dATP, 100mM （锂盐） dTTP, 100mM （锂盐） dCTP, 100mM （锂盐） dGTP, 100mM （锂盐）
MDX046 MDX049 MDX047 MDX048 MDX059
dNTP Mix, 10mM （锂盐） dNTP Mix, 40mM （锂盐）
www.meridianbioscience.com/lifescience
About Meridian 关于迈迪安
Meridian BioScience迈迪安生物科技（中文简称：迈迪 安）是一家全球整合型生命科学公司，专注开发、生产、销 售和分销各种创新诊断产品和关键原材料。我们致力于开发 和提供更好的解决方案，以快速、准确和简便的方式提供答 案，重新定义从发现到诊断的生命可能性。 作为迈迪安的生命科学部门，我们专注于为免疫和分子检测 制造商提供用于人类、动物、植物和环境应用检测的上游原 料，包括抗原、抗体、阻断剂、分子酶、核苷酸以及用于 qPCR和等温扩增应用的优化预混液，旨在简化检测开发，提 高检测性能。 我们的宗旨是为检测开发商提供所需的解决方案--从针对寨 卡和新冠等重大疾病的新型抗原和抗体，到开创市场的创新 型风干 qPCR/RT-qPCR 预混液。我们为能向客户提供卓越的 优质产品、技术支持和客户服务而感到自豪。
订购信息 Meridian Life Science, Inc. Sara Zhou Sales Manager，China 手机：+86-010-8566 0600 邮件：info.cn@meridianlifescience.com 丁香通店铺：meridianlifescience.biomart.cn www.MeridianBioscience.com/lifescience
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