Isothermal amplification flyer -CN

等温扩增技术彻底改变了Point-of-Care (POC) 领域,为更快、更便捷的诊断铺平 了道路。

在Meridian Bioscience迈迪安生物科技,我们致力于开发超灵敏、高特异和更快速的 分子酶和预混液,以支持新一代灵敏、价廉的 POC 和高通量分子诊断检测。

等温扩增(包括HAD、MCA、NASBA和LAMP)是一种恒温DNA扩增技术,在分子诊断中发挥着越来越重要的作用。与qPCR相比,等温扩增具 有快速、可兼容低耗能设备的优势,因此特别适合现场场景的诊断。等温扩增技术已被广泛应用,包括检测沙门氏菌和疟疾等病原体、转基因 作物污染以及法医检测等。 等温扩增

等温扩增中影响检测性能的 4 大关键因素:

•  速度: 缩短检出结果时间(TTR),提高检测通量。 •  灵敏度: 可以扩增低量的DNA/RNA模板。 •  抗抑性: 对抑制物具有强耐受性能的酶,有助于提高对临床样本检测的稳健性和可靠性。 •  兼容性: 对缓冲液中的各组分进行优化,可最大限度地提高检测效率和灵敏度。为了与冻干兼容,需要在不含甘油的条件下对检测体系的化 学成分进行仔细优化,同时还需要考虑到辅料和稳定剂,以确保酶的性能在干燥过程中不受到影响。

环介导等温扩增(LAMP)是最常用的等温扩增方法之一。不过,基于核酸序列的扩增(NASBA)等替代技术现在也越来越受欢迎,其优点是在 较低温度下(通常在41°C左右)直接扩增RNA,无需热循环仪或单独的逆转录步骤。与需要4 - 6个引物的LAMP反应不同,NASBA反应只使用两 个引物,因此引物设计不那么复杂,也更容易优化。迈迪安为开发LAMP和NASBA等温扩增提供了最先进的解决方案,推动了分子检测的发展。

1°C <1小时 简单 2 T7 RNA聚合酶,AMV逆转录酶,RNA酶H 逆转录 T7 RNA聚合酶,AMV逆转录酶,RNA酶H RNA mRNA,ncRNA,病毒RNA检测

60 - 65°C <1小时

反应温度 反应时间 引物设计复杂程度 需要优化的引物数量

复杂 4 - 6 Bst DNA聚合酶(RT-LAMP额外需要逆转录酶) 链置换 依赖Bst酶的链置换活性 DNA/RNA 或 cDNA 病原体检测(细菌、病毒或寄生虫)和基因突变

需要的酶 扩增方法 模板延伸原理

检测靶标 适用应用

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