NASBA
开发等温扩增、低温循环和低浓度RNA检测的首选
基于核酸序列的扩增（Nuclear acid sequence-based amplification，NASBA）是另一种等温扩增方法，能直接扩增检测RNA靶标。NASBA技术具 有快速扩增、高灵敏度和高特异性的特点，不仅在临床病毒学中特别有用，在便携性至关重要的 POC 应用中也非常有用。 NASBA使用两个靶标特异性引物，即“有义“和“反义“引物，其中一个引物含有T7 RNA聚合酶的启动子序列。RNA反转录为cDNA形成cDNA-RNA 杂交链，随后其中的RNA链被RNase H水解，在AMV逆转录酶的作用下生成dsDNA。该dsDNA被 T7 RNA 聚合酶转录为RNA，并产生指数扩增。 NASBA反应过程
带有T7启动子的引物（P1）
指数扩增
RNA靶标
扩增的RNA靶标
“
AMV逆转录酶
T7 RNA聚合酶
NASBA非常适合在恒定和较低 温度下直接对RNA进行高特异 性扩增，是检测极低浓度RNA 的理想之选，如病毒载量的定量 或RNA病毒的早期检测。 ”
cDNA
RNA
dsDNA
RNase H
AMV逆转录酶
cDNA
cDNA
非T7引物（P2）
依靠逆转录酶的 DNA聚合酶活性
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