食品安全检测 提高灵敏度和特异性、减少样本 处理时间的分子检测试剂
食品安全检测 提高灵敏度和特异性、减少样本 处理时间的分子检测试剂
食品安全关乎生命健康，是保护人类健康和提高人类生活质量的基础。 目前，食品安 全已成为全球重大战略性问题，越来越受到世界各国的高度重视。 检测食源性病原 体的存在及其潜在危害，转基因食品，加工肉制品中的肉类来源，适合素食者或过敏者 的食物标签是否正确是食品工业质量评估中至关重要的内容。 传统微生物培养检测耗时且灵敏度低，分子检测法具有更明显的优势，包括更快速、更多选择性、多重检测能力和高灵 敏度，正作为另一种替代工具变得越来越广泛。 迈迪安提供一系列的优化即用型qPCR和RT-qPCR预混液为食品安全分子检测提供理想的解决方案。尤其是迈迪安推 出的全球首款可风干预混液试剂，为粗裂解样本的快速灵敏检测提供了一种全新的选择。 该产品具有抑制物耐受性和 高灵敏度，并可以通过风干的方法制备成常温稳定的干燥型检测。无论是使用液体还是干燥形式检测，都有相同的 高效检测性能。 干燥后试剂的高度稳定性也可降低冷链存储的需求，提高试剂的保质期，从而可更好地节省食物安 全管理的成本。
食品安全分子检测
预防食源性疾病的病原体检测
在美国，现已知有31种食源性病原体。据估计，病毒感染是患病的主要原因，细菌感染是引起住院治疗和死亡的主要原 因（Scallan, E., et al. ，2011）。 导致大多数食源性疾病暴发的常见食源性病原体包括有单核增生李斯特菌、大肠杆菌 O157:H7、金黄色葡萄球菌、肠道沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌、弧菌、空肠弯曲杆菌、产气荚膜梭菌和产志贺毒素大肠杆 菌(STEC) （Oliver, S. P., et al. ，2005) 。 几十年来，减少病原体检测的耗时一直是食品微生物学家的主要目标。基于PCR的分子检测法优势是比微生物培养法更 灵敏， 且不需要对生物样本进行富集处理。此外，该方法可以直接对粗裂解样本进行检测，并实现自动化，提高检测结 果的可重复性。
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可风干预混液在风干前后对不同浓度(10 6 to 10 cfu) 的病原体均能达到高灵敏度检测
A) 扩增曲线：金黄色葡萄球菌
B) 扩增曲线：单核增生李斯特菌
标准曲线：金黄色葡萄球菌
标准曲线：单核增生李斯特菌
Figure 1. 将（A）金黄色葡萄球菌和（B）单核增生李斯特菌分别进行连续10倍稀释，使用Air-Dryable ™ qPCR Mix (MDX082)对16s基因 进行扩增。结果显示，可风干qPCR试剂在干燥前和干燥后的扩增效率分别保持在98%和100%，最低检测极限可低至10 cfu/每反应。
可风干预混液对粗裂解样本的高度抗抑性和高灵敏度检测
Figure 2. 对含有甲型肝炎RNA的0.8%海鲜提取物样本进行连续 10倍稀释后，使用Air-Dryable ™ RT-qPCR Mix (MDX095) 进行扩增。结果显示了可风干RT-qPCR预混液对粗裂解 样本中较低含量的靶标甲肝基因高灵敏的扩增。
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保护消费者权益和健康的食品真伪检测
食品真伪检测是用来证实食品含量的真实性及其标识的正确性及准确性。 各国政府均制定了检验产品真实性和来源的法 规，包括来自进口的产品。故意掺假或假冒被认为是食品欺诈行为，可导致数十亿的经济损失和品牌声誉的长期损害， 并对公众健康造成严重威胁。常见的食品欺诈检测包括转基因检测和肉类或鱼类物种鉴定。
可风干预混液对复杂的食品样本中较低浓度污染物的高特异性检测
Amplification
Figure 3. 使用Air-Dryable ™ qPCR Mix (MDX082)分别检测牛 肉(黑色)、猪肉(酒红色)和混杂了0.4%牛肉(红色)的猪肉样本中 的牛线粒体ATP合成酶DNA靶标。结果表明，可风干qPCR预 混液能够区分混杂了牛肉的猪肉， 对其中极少量的靶标DNA具 有高特异性的检测。
Amplification plot
Standard curve
Figure 4. 对牛线粒体ATP合成酶DNA靶标进行连续10倍稀释后使用Air-Dryable ™ qPCR Mix (MDX082)对其扩增。结果显示了可风干qPCR预混 液 (MDX082)的高灵敏度和可重现性， 能够检测到1个基因组当量的靶标(蓝色)，并且具有高效的扩增效率。
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具有常温稳定检测的优势 在各大检测生产厂商不断寻求检测操作简便性的需求下，常温稳定的干燥型检测越来越流行。 其主要优势是可以省去冷 链存储，提高产品在常温下的稳定性，并可实现单管检测的方案。 总体来说，常温稳定的检测可以降低运输和存储的成 本，并且延长常温保存下的保质期。 可风干RT-qPCR和qPCR预混液使用简便，是用来开发常温稳定、多重分子检测的理想选择。 该产品不含甘油，含有 Taq聚合酶、反应缓冲液、dNTPs、MgCl 2 和特殊的风干辅料。只需要向可风干qPCR试剂中添加特异性引物和探针后进 行风干即可。
常温下长达12个月的稳定性
Figure 5. Air-Dryable ™ qPCR Mix 经风干处理后进行稳定性检测。 风干反应混合物在37℃下保存8周，随后对经过100倍稀释的模板进 行q PCR检测，反应与使用新鲜配制的混合液（红色）进行比照。 通过该加速稳定性试验结果显示，风干预混液干燥后可保证长达至 少12个月的常温稳定性。
新鲜湿液 | 37°C
推荐的分子试剂
优化的预混液
MDX030 Low DNA qPCR 预混液 适用于微生物和真菌DNA的多重检测，含有低DNA背景污染 的化学热启动DNA聚合酶。 MDX020 快速qPCR 预混液 适用于富含抑制物样本的快速高度多重的DNA检测，含有抗体 热启动聚合酶。 MDX032 快速一步法 RT-qPCR 预混液 适用于富含抑制物样本的快速高度多重的DNA和RNA检测，含有 抗体热启动聚合酶， MMLV-RT 和 RNA酶抑制剂。 MDX013 抗抑性qPCR 预混液 适用于直接从粗裂解液或者富含抑制物的样本，如尿液、脑脊液、 血液和植物的扩增，含有抗体热启动聚合酶。 MDX016 抗抑性RT-qPCR 预混液 单管4x预混液，适用于唾液和粪便等富含抑制物的粗裂解液样本、 免核酸提取的直接扩增。
MDX082 Air-Dryable ™ qPCR Mix, 4x 适用于干燥箱风干的即用型可风干qPCR预混液。 MDX095 Air-Dryable ™ RT-qPCR Mix, 4x 适用于干燥箱风干的即用型可风干RT-qPCR预混液
MDX021 Lyo-Ready ™ qPCR Mix 含有专门冻干赋形剂可冻干成团状或粒状的即用型，无甘油可冻干 qPCR预混液 MDX024 Lyo-Ready ™ 1-Step RT-qPCR Mix 含有专门冻干赋形剂可冻干成团状或粒状的即用型、无甘油可冻干 RT-qPCR预混液 MDX062 Lyo-Ready ™ 1-Step RT-qPCR Virus Mix 含有专门冻干赋形剂，可冻干成团状或粒状的即用型、无甘油可冻 干RT-qPCR预混液， 适用于RNA病毒扩增 MDX097 Lyo-Ready ™ LAMP Mix 含有专门冻干赋形剂可冻干成团状或粒状的即用型、无甘油可冻干 LAMP 预混液
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推荐的分子试剂 续..
酶
TAQ 聚合酶 MDX011 无甘油T aq 热启动聚合酶 HS 50 U/μL 可冻干，高浓度 (50 U/uL),无甘油的DNA聚合酶，适用于自动化 高通量检测（抗体，酶和稀释缓冲剂单独提供） MDX015 Aptamer HS 热启动聚合酶 (无甘油） 高浓度的可冻干兼容的Taq DNA聚合酶，包含可逆地与聚合酶结合 的DNA适配体。适用于开发高特异性、高通量的检测。 MDX009 Low DNA热启动聚合酶 HS 5 U/μL 化学热启动的DNA聚合酶，适用于细菌和真菌的多重DNA扩增。 MDX010 Low DNA 热启动聚合酶 HS 10 U/μL 化学热启动的DNA聚合酶，适用于细菌和真菌的多重DNA扩增。 MDX001 Taq DNA 聚合酶 DNA聚合酶，结合优化的缓冲液体系，利于多种模板的快速 PCR扩增。 MDX008 Taq 热启动DNA聚合酶 HS 抗体介导的热启动聚合酶，适用于快速多重反应。在含有 PCR抑制物和低拷贝数的情况下，也有稳健的性能.
等温扩增聚合酶 MDX012 Bst DNA 聚合酶 稳定、耐热的DNA聚合酶，适用于LAMP，包含5 ‘ -> 3 ‘的 DNA聚合酶活性和链置换活性。 MDX018 高浓度无甘油 Bst DNA聚合酶 稳定、耐热的DNA聚合酶，适用于LAMP， 可兼容冻干，高浓度 100 U/mL MDX019 抗抑性 Bst 缓冲液 为 MDX012 和 MDX018 优化的缓冲液， 可提高扩增速度、灵敏 度、耐盐度和对临床样本及样本保存液中抑制剂的耐受性 逆转录酶 MDX044 MMLV逆转录酶 适用于生成长度达9kb的第一链cDNA，可用于多重扩增的 MMLV-RT。 MDX043 RNase-Tolerant MMLV逆转录酶 含MMLV 逆转录酶和RNA酶抑制剂， 可检测富含抑制物样本中 低浓度的RNA靶标。
其他相关试剂
MDX004 Tissue Extract-PCR 缓冲液 与Taq热启动DNA聚合酶 (MDX008) 搭配使用的优化裂解中和缓冲 液，可直接从粗裂解液中进行PCR 扩增。
MDX033 Fast qPCR 缓冲液, 4x 为Taq热启动DNA聚合酶 (MDX008) 优化的缓冲液。
MDX034 1-Step RT-qPCR 缓冲液 4x 为Taq 热启动DNA聚合酶 (MDX008) 和RNA酶耐受MMLV逆转录酶 (MDX043) 优化的缓冲液。 MDX056 RNase 酶抑制剂 可抑制广泛的真核RNA酶，包括RNA酶A,B 和C，以控制RT-PCR 中的污染物。 MDX014 Taq 热启动抗体 用于热启动PCR的Taq DNA聚合酶单抗 ，室温下可抑制Taq DNA 聚合酶的活性。
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快速分子产品选择指南
产品名称
产品编号
MDX030
化学
Low DNA qPCR 预混液
MDX020
抗体
快速qPCR 预混液
MDX032
抗体
快速一步法RT-qPCR预混液
MDX013
抗体
抗抑性qPCR预混液
MDX082
抗体
Air-Dryable TM qPCR Mix, 4x
MDX095
抗体
Air-Dryable TM RT-qPCR Mix, 4x
MDX016
抗体
抗抑性RT-qPCR 预混液
MDX021
抗体
Lyo-Ready TM qPCR Mix
MDX024
抗体
Lyo-Ready TM 1-Step RT-qPCR Mix
Lyo-Ready TM 1-Step RT-qPCR Virus Mix
MDX062
抗体
MDX097
无
Lyo-Ready TM LAMP Mix
MDX011
抗体
无甘油Taq热启动聚合酶HS
MDX015
适配子
Aptamer HS 热启动聚合酶 (无甘油）
MDX009 & MDX010
化学
Low DNA Taq 热启动聚合酶 HS
MDX001
无
Taq DNA 聚合酶
MDX008
抗体
Taq DNA 热启动聚合酶 HS
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