分子技术引领检测方案设计| qPCR
不同测序方法在突变检测能力 和基因组覆盖范围上存在差异
分子技术的选择决定检测方案的设计路径
突变数量
对于诊断试剂开发者而言，要同时满足临床需求与运营效率，必须在分析性能、成本 效益与使用便捷性之间寻找最佳平衡。精准肿瘤学的发展依赖于高度准确的技术手段， 用以识别关键基因变异、指导治疗决策，并确保在不同医疗场景中都能可靠解读和应 用检测结果。 在当前的市场格局中，三种核心分子技术—— qPCR , 靶向测序 (targeted nextgeneration sequencing, tNGS )，及全基因组测序（whole-genome sequencing, WGS )—已成为 主流。这些技术构成了绝大多数已获监管批准的肿瘤诊断产品的基础，因其在临床适用 性、可扩展性以及成熟的合规路径方面具备显著优势 10, 11 。 选择合适的技术需要与检测的预期用途精准匹配，因为不同技术在检测时效、覆盖范围、基 础设施需求和可及性方面各有优劣。在检测方案设计与产品商业化过程中，必须综合权衡这 些因素，以最大程度提升其临床价值和市场可行性。
qPCR 以简驭精的快速精准工具
定量PCR (qPCR) 是目前应用最广泛、技术最成熟的肿瘤分 子诊断平台。它构成了众多FDA批准的伴随诊断的核心基 础（见表1），广泛用于支持靶向治疗决策，例如：EGFR 突变检测（非小细胞肺癌）、BRAF V600E突变检测（黑色 素瘤） 12 、KRAS野生型状态确认（结直肠癌） 13 。 这些检测多采用等位基因特异性扩增或探针杂交检测等方 法，能够在样本量极少的情况下实现高度精确、可重复的 分析结果。
qPCR的主要优势包括：快速周转时间-多数检测可在数小 时内完成；成本低；对单点或少量已知突变具有极高灵敏 度，尤其适用于已明确遗传驱动因素的癌种。 然而，qPCR的局限也同样明显：它依赖于预设靶点，无法 识别未知突变或复杂的基因改变（如融合基因、结构变异 等）。因此，尽管qPCR仍被视为已知驱动突变检测的金标 准，其分析范围相对较窄，使其不适用于需要广泛基因组 分析或追踪新兴生物标志物的应用场景 14 。
表 1. 经FDA批准已用于临床实践的qPCR精准肿瘤学检测实例
目前已有 68种 不同的FDA批准的 伴随诊断设备 (包括体外诊断工具 和影像学工具）
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