Multiplex testing for COVID-19, Flu and RSV Chinese

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分子POCT检测 & 多重检测 分子检测需要熟练的技术人员使用精密的实验室仪器操作,对检测试剂的冷藏处于以维持产品的保质 期也有要求。这些挑战对一个集中的大型实验室来说可以应付的,但在需要及时检测(POCT)的情 况下却不适用。

性和可风干的特点,可用于开发常温稳定的检测。与冻干不同 的是,风干相对更快速、便宜,并且可通过普通的烘箱干燥。 针对特定样本的Air-Dryable™可风干检测试剂是专为克服唾液/ 痰液、血液、尿液和粪便中存在的抑制物而设计的优化配方。 尤其是新型的Air-Dryable™ Direct RNA/DNA qPCR Saliva Mix 可风干唾液直扩RT-qPCR预混液(MDX131)是适用于流感/ COVID-19/RSV多重联检的理想选择。其优化的配方可从唾液或 痰液粗裂解样本中灵敏地检测RNA靶标,只需添加引物和探针 即可完成检测。该试剂既可以直接以液体形式使用,也可以通 过烘箱或空气干燥成常温稳定的干燥型试剂使用于多重分子检 测中。Air-Dryable™ Direct RNA/DNA qPCR Saliva 可风干唾液 直扩RT-qPCR预混液(MDX131)对痰液、粘蛋白、UTM拭子等 具有超强的耐受性能。目前该试剂已用于呼吸道多重联检中检 测COVID-19,流感,RSV, 支原体 等常见病原体。该试剂的灵 敏度可以检测低于10个拷贝的靶标,并且可兼容液体或干燥的 检测形式。

迈迪安公司开发了两种用于分子检测的POCT试剂。一种是可 兼容冻干的预混液(Lyo-Ready™ 可冻干qPCR系列),它是 不含甘油、含有优化的专用冻干赋型剂的配方,只需要添加引 物和探针即可。该配方可作为液体试剂用于即时多重RT-qPCR 诊断检测,或冻干成粉状或粒状用于开发常温稳定的干燥型检 测。Lyo-eady™ 1-Step RT-qPCR Mix 可冻干一步法RT-qPCR 预混液(MDX024)和 Lyo-Ready™ 1-Step RT-qPCR Virus Mix 可冻干一步法病毒检测RT-qPCR预混液(MDX062)目前 已在全球各地获证的体外诊断检测中被广泛使用。尤其是 MDX062,它是专为具有高度二级结构的RNA或DNA病毒的扩 增而设计的(逆转录酶在55-60°C保持活性,参考Figure 3的性 能数据)。

第二种POCT解决方案是迈迪安公司新推出的可兼容风干的 Air-Dryable™ Direct RNA/DNA产品线,它结合了抑制物耐受

MERS-CoV

Influenza A

RSV

Figure 3.  使用Lyo-Ready™ 1-Step RT-qPCR Virus Mix 多重DNA和RNA 病毒靶标的多重检测 使用Lyo-Ready™ 1-Step RT-qPCR Virus Mix 可冻干一步法病毒检测 RT-qPCR预混液(MDX062)对灭活病毒粗裂解样本中的呼吸道合胞病毒 (RSV, 绿色 )、轮状病毒( 紫色 )和登革2型病毒(DENV-2, 红色 ) 进行多重RT-qPCR扩增。结果表明,Lyo-Ready™ 1-Step RT-qPCR Virus Mix可用于多重RT-qPCR检测,从单个样本中同时检测多个低拷贝数 RNA靶标。

Figure 4.  使用Air-Dryable™ Direct RNA/DNA qPCR Saliva(MDX131) 进行呼吸道多联检侧 对含有35% UTM拭子样本中的3种呼吸道病原体(甲型流感、MERS-CoV和 RSV)进行多重扩增。结果显示,Air-Dryable™ Direct RNA/DNA qPCR Saliva可风干唾液直扩RT-qPCR预混液( 蓝色 )与供应商T( 红色 )或 供应商Q( 灰色 )提供的抗抑型试剂相比具有更高的抑制物耐受性和多重扩 增性能。

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