Meridian NGS Enzymes brochure -CN

文库扩增

步骤 6

无甘油高保真Pfu聚合酶 (HC)

产品货号 #MDX203

体积 单位数 100 μ L 500 个单位 250 μ L 20,000 个单位

无甘油高保真Pfu聚合酶 (HC) (MDX203) 是一种高保真热稳定的DNA 依赖 性DNA 聚合酶,来自 暴热球菌 ( Pyrococcus furiosus )。Pfu 聚合酶的3’ - 5’ 校对外切酶活性使其适用于需要高保真DNA合成或钝头PCR片段的应用。 无甘油高保真Pfu聚合酶 (HC) 浓度20U/μL,并搭配提供含有镁离子、dNTPs 和冻干所需赋形剂的无甘油5x反应缓冲液。

产品亮点 • 高 浓度Pfu聚合酶,适用于 大规模PCR预混液生产 • 适用于NGS文库扩增 • 无甘油,适用于冻干PCR检测 • 浓度为20 U/μL

冻干后多重反应性能

(左图)无甘油高保真 Pfu聚合酶(HC)(MDX203)冻干后在 37°C 下分别储存1周和4 周。在对7个不同GC含量的靶标进行多重PCR扩增时,将冻干样品与未冻干的相同酶和反应 缓冲液进行了对比测试:793 bp (32% GC)、649 bp (54% GC)、548 bp (60% GC)、418 bp (48% GC)、332 bp (48% GC)、196 bp (51% GC)、135 bp (55% GC)。结果显示,冻干的 MDX203在37°C温度下至少1个月保持稳定,活性不会降低,冻干后常温下的稳定性为1年。

Lyo Day 7 at 37°C

Lyo Day 28 at 37°C

Wet Reference

Lyo Day 0

提供全组分一体化试剂盒

冻干NGS建库试剂盒

产品货号 #MDX219-A

反应数

袋装

Meridian推出的冻干NGS建库试剂盒(MDX219)专为简化建库操作流程而 设计,旨在展示冻干技术在NGS文库构建中的应用价值。该试剂盒是一款即 用型、适用于合成测序(SBS)流程的完整解决方案,包含以下三个模块: •  末端修复/dA尾加成模块:用于将片段化的DNA修饰为带有5’磷酸和3’dA 尾的文库构建起始片段; •  连接酶模块:用于连接测序接头; •  高保真PCR扩增模块(可选):用于后续文库扩增,提升产量和文库质 量。 该试剂盒展示了冻干技术如何提高文库制备的稳定性与便携性,是NGS工作 流程优化的理想选择。

产品亮点 • 冻 干反应体系密封于小袋中, 可在常温下实现稳定储存与运输 • 即开即用—内含文库构建所需

8

1/ER/dA, 2/LIG

产品货号 #MDX219-B

反应数 袋装 8 1/ER/dA, 2/LIG, 3/PCR

全部关键酶(末端修复/dA尾 加成、连接、扩增),只需加 入片段化DNA,即可开始建库 • 经济高效、可持续且易于获取的NGS检测解决方案

A)

B)

对比使用冻干与液体试剂构建的文库性能:图A 展示了比对效率,图B展示了所生成文库的GC 含量。在两项指标中,冻干与液体配方的表现 均高度一致,均显示出良好的比对效率和可比 的GC含量,说明冻干试剂在文库构建中的性能 与传统液体试剂相当。

文库

平均比对读数率(%)

冻干建库试剂盒

99.79 ± 0.04

液体建库试剂盒

99.74 ± 0.12

冻干 | 液体

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