无甘油 T7 RNA 聚合酶 高浓度 (1,000 U/μL)无甘油,适用于大规 模RNA合成
无甘油 T7 RNA 聚合酶 高浓度 (1,000 U/μL)无甘油,适用于大规 模RNA合成
无甘油T7 RNA聚合酶(HC)是一种高浓度(1,000 U/μL) DNA依赖的RNA聚合酶。该酶高度特异 识别T7噬菌体双链的启动子序列,从5′→3′合成与启动子下游的单链DNA或双链DNA模板链互 补的RNA。
T7 RNA聚合酶是一种源自T7噬菌体的DNA依赖性RNA聚合酶,是体外转录(IVT)的行业标准酶。它可以有效地结合标准或修饰的三磷酸核糖核苷 酸(NTPs),快速合成大量mRNA,使其成为体外合成标记或未标记RNA的理想酶,用于科研、诊断或临床应用。应用于依赖核酸序列的等温扩增 (NASBA), mRNA疫苗生产,以及基于RNA的治疗和研究应用,包括用于RNA干扰药物的miRNA和siRNA合成,用于CRISPR/Cas9体系中的 sgRNA合成。 T7 RNA聚合酶在无甘油存在的情况下提供卓越的性能,可用于开发可靠的体外转录检测。此外,它额外具有可兼容冻干的特性,冻干后可以用 于常温储存,或用于微型检测体系。
产品应用
产品
产品编号 体积 反应数
• RNA合成 (包括mRNA和sgRNA) • 合成用于杂交的RNA探针或用于体外RNA翻译的 RNA模板 • 合成放射性标记/荧光标记RNA探针 • 生产反义RNA • 依赖核酸序列的等温扩增(NASBA)
50 uL 50,000 个单位
Glycerol-Free T7 RNA Polymerase (HC)
MDX201
500 uL 500,000 个单位
www.meridianbioscience.com/lifescience
产品亮点 RNA 产量:凝胶电泳
将无甘油T7 RNA 聚合酶 (HC) (MDX201) 和 Lyo-Ready TM 可冻干转录缓冲液一起冻干进行反应,同 时与新鲜配置的MDX201,NEB T7 RNA聚合酶和 ThermoFisher T7 RNA聚合酶进行对比验证。反应在 37℃下孵育24小时,反应产物通过RNA提纯试剂盒(提 取柱法)纯化。纯化后的RNA在1.5%琼脂糖凝胶上检 测,使用溴化乙啶染色,紫外荧光观察。检测结果显示 与同类T7 RNA聚合酶相比,使用MDX201合成的RNA产 量要高得多。
RNA 产量:分光光度仪检测
使用0.1 ng的双链DNA模板编码的1 kb或4.5 kb的RNA进行体外转录反应。分别使用冻干的无甘油T7 RNA聚合酶(HC) (MDX201, 红色 )、NEB T7 RNA聚合酶( 橙色 )和 ThermoFisher T7 RNA聚合酶( 黑色 )在37℃下孵育8小时,比较它们转录的RNA产量。其中在不同时间点的反应管被取出放到-20°C以停止反应,然后在最后一个反应时间点后统 一通过RNA提取试剂盒(提取柱法)纯化后在 NanoDrop TM 分光光度仪上检测RNA浓度。检测结果显示,在不同时间点使用MDX201进行转录得到的RNA产量都要远远高于对比 试剂。
冻干后酶的活性不受影响
将无甘油T7 RNA 聚合酶 (HC) (MDX201) 和 Lyo-Ready TM 可冻干转录缓冲液一起冻干后保存在37°C进行加速热稳 定性检测,与新鲜配置的MDX201进行的转录反应进行 对比。反应在37°C进行2小时,反应产物通过RNA提纯 试剂盒(提取柱法)纯化。纯化后的RNA在1.5%琼脂糖 凝胶上检测,使用溴化乙啶染色,紫外荧光观察。结果 显示,无甘油T7 RNA聚合酶(HC)不受冻干影响,在复溶 后依然保持相同的活性。
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