产品亮点 RNA 产量:凝胶电泳
将无甘油T7 RNA 聚合酶 (HC) (MDX201) 和 Lyo-Ready TM 可冻干转录缓冲液一起冻干进行反应,同 时与新鲜配置的MDX201,NEB T7 RNA聚合酶和 ThermoFisher T7 RNA聚合酶进行对比验证。反应在 37℃下孵育24小时,反应产物通过RNA提纯试剂盒(提 取柱法)纯化。纯化后的RNA在1.5%琼脂糖凝胶上检 测,使用溴化乙啶染色,紫外荧光观察。检测结果显示 与同类T7 RNA聚合酶相比,使用MDX201合成的RNA产 量要高得多。
RNA 产量:分光光度仪检测
使用0.1 ng的双链DNA模板编码的1 kb或4.5 kb的RNA进行体外转录反应。分别使用冻干的无甘油T7 RNA聚合酶(HC) (MDX201, 红色 )、NEB T7 RNA聚合酶( 橙色 )和 ThermoFisher T7 RNA聚合酶( 黑色 )在37℃下孵育8小时,比较它们转录的RNA产量。其中在不同时间点的反应管被取出放到-20°C以停止反应,然后在最后一个反应时间点后统 一通过RNA提取试剂盒(提取柱法)纯化后在 NanoDrop TM 分光光度仪上检测RNA浓度。检测结果显示,在不同时间点使用MDX201进行转录得到的RNA产量都要远远高于对比 试剂。
冻干后酶的活性不受影响
将无甘油T7 RNA 聚合酶 (HC) (MDX201) 和 Lyo-Ready TM 可冻干转录缓冲液一起冻干后保存在37°C进行加速热稳 定性检测,与新鲜配置的MDX201进行的转录反应进行 对比。反应在37°C进行2小时,反应产物通过RNA提纯 试剂盒(提取柱法)纯化。纯化后的RNA在1.5%琼脂糖 凝胶上检测,使用溴化乙啶染色,紫外荧光观察。结果 显示,无甘油T7 RNA聚合酶(HC)不受冻干影响,在复溶 后依然保持相同的活性。
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