对高浓度血液(20% K2-EDTA全血)强耐受性
使用可风干血液直扩RT-qPCR预混液 (MDX121) 对含20% K2-EDTA的全血样本中的两个 病毒RNA靶点(HIV, HCV)和一个DNA靶点(HBV) 进行三重RT-qPCR扩增。结果显示,可 风干血液直扩RT-qPCR预混液对高浓度全血样本具较强强的抑制物耐受性,并且扩增性 能有高度可重复性。
HCV
HBV
HIV
对含有抗凝剂(K2-EDTA、肝素钠和柠檬酸钠)全血的强耐受性
抗凝剂(K2-EDTA、肝素钠和柠檬酸钠)和高 浓度的全血会抑制qPCR的扩增效率。使用 (A) 可风干血液直扩qPCR预混液 (MDX092) 、对照试剂KAPA Probe Force (Roche) 和 TaqPath™ (Thermo),和(B) 可风干血液直 扩RT-qPCR预混液 (MDX121)、对照试剂 Ultraplex™ (QuantBio) 和 TaqPath™ 1-Step (Thermo),分别对含有K2-EDTA(橙 色),肝素钠(绿色)或柠檬酸钠(灰色) 的0% 2%, 5%和20%的人体全血进行免核酸提取直 接扩增。结果显示,在含有抗凝剂和高浓度 血液的样本中,可风干血液直扩qPCR/ RT-qPCR预混液的扩增效率都要高于其他对 比试剂。
A) Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Blood (MDX092)
B) Air-Dryable ™ Direct RNA/DNA qPCR Blood (MDX121)
K2-EDTA | 肝素钠 | 柠檬酸钠
风干不影响扩增效率和灵敏度 Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Blood (MDX092)
A
B
20% K2-EDTA 全血
20%血清
干燥 | 湿液 | KAPA Probe Force (Roche)
向 A) 含有20% K2-EDTA的全血,或 B) 20%的血清中加入连续10倍稀释的质粒DNA(分别为10000、1000、100和10个拷贝),分别使 用可风干血液直扩qPCR预混液 MDX092的湿液(蓝色)、风干液(红色)与KAPA Probe Force (Roche,橙色)检测恶心疟原虫。结果显 示,干燥后的可风干血液qPCR直扩预混液与湿液相比,对血液样本保持同样的扩增效率和灵敏度,并且比供应商R的对比试剂具有 更高的荧光强度和灵敏度。
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