心脏标志物高通量检测技术
高通量心脏生物标志物检测中常用的荧光与化学发光免疫检测技术对比：
FIA | 荧光免疫检测
特点
CLIA | 化学发光免疫检测
标记荧光团的抗体在光学激发下发射特定波长 的荧光信号，荧光强度与分析物浓度成正比
酶标抗体催化化学发光反应， 无需外部激发即可产生可检测的光信号
检测原理
荧光发射
化学发光信号
信号类型
检测灵敏度通常在pg/mL级别； 可能受背景荧光或光学噪声影响 特异性取决于抗体亲和力与试剂设计； 整体与CLIA相当
检测灵敏度可达到fg/mL级别； 信号放大能力强、动态范围更宽 特异性同样依赖抗体选择， 整体与FIA可比
检测灵敏度
特异性
广泛应用于自动化高通量系统，如Abbott Architect、Siemens ADVIA Centaur、Roche Cobas e系列、Beckman Coulter Access等
常用于部分高敏系统及电化学发光（ECL） 平台，例如部分Roche Cobas分析仪
常见应用
具有灵敏度高、检测速度快等特点， 适用于紧凑型或中小型分析设备
具有超高灵敏度、宽线性范围， 适合连续、大批量检测
性能特点
评估方法
针对 cTnI 、 CK-MB 和 NT-proBNP 的特异性抗体对，分别在两步夹心法（two-step sandwich format） 下采用 FIA与CLIA进行评估。在 FIA 中，捕获抗体固定于硝酸纤维素（NC）膜上，检测抗体与 铕进行偶联；在CLIA中， 捕获抗体包被于磁珠表面识别抗体与碱性磷酸酶（ALP） 偶联。每组抗体对均测定其 检测限（LOD），用于比 较不同体系下的灵敏度表现
两步夹心法
检测抗体偶联物 FIA | 铕标记抗体 CLIA | ALP标记抗体
加入样本
加入检测抗体
抗原
FIA | 固定于NC膜 CLIA | 磁珠包被 捕获抗体
Powered by FlippingBook