分子诊断检测正逐步向冻干的方向发展。 它的优势包括可常温运输和储存,更长的保质期,以及样本体积更灵活。然而,为了可兼容冻干,酶制剂必须是无甘油且含有特殊的冻干赋形剂, 从而在各种冻干条件下(包括冷冻、温度梯度、真空和脱水)可保证混合物稳定性。理想的冻干配方可保证酶在冻干形式下的稳定性,以及酶制剂在快速水化和激活之后的性能不受影响。
适用于开发常温检测的分子检测试剂
为冻干或风干优化的DNA聚合酶和qPCR/ RT-qPCR预混液配方
主要应用
人体诊断
血筛
基因筛查
动物诊断
环境监测
水质检测
食品检测
分子诊断检测正向冻干和风干模式发展。 它的优势包括可常温运输和储存,更长的保 质期,以及样本体积更灵活。然而,为了可兼容冻干,酶制剂必须是无甘油且含有特殊 的赋形剂,从而各种条件下(包括冷冻、温度梯度、真空和脱水)可保证混合物稳定 性。理想的冻干配方可保证酶在冻干形式下的稳定性,以及酶制剂在快速水化和激活之 后的性能不受影响。
血液 唾液 尿液 粪便
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风干
产品特点:
• 无甘油预混液,包含Taq聚合酶,反应缓冲液,核苷酸, MgCl 2 ,和风干赋形剂 • 适合开发用于临床样品免核酸提取的直接扩增
• 适用于POC诊断平台或自动化高通量平台的多重检测 • 可用于液体或干燥形式检测,用于开发常温稳定的检测 • 可兼容不同风干条件 • 简单易操作,比其他干燥技术成本更低
Air-Dryable ™ qPCR Mix | 应用:
• 适用于各种样本类型的抗抑性预混液 • 减少样本处理过程,免去核酸提取步骤
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL 1,000 个反应 50 mL 10,000 个反应
Air-Dryable ™ qPCR Mix, 4x MDX082
产品亮点 风干后酶仍保留完整活性
液体 | 风干后
使用可风干qPCR预混液对10倍稀释的小鼠cDNA模板进行单 重扩增,对比湿液和风干液的活性。结果显示,与新鲜制备 的湿液相比,风干后酶活性和灵敏度没有降低,并且达到检 测的分析限度.
Air-Dryable ™ RT-qPCR Mix | 应用:
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
1,000 个反应
0% UTM+痰液 5% UTM+痰液 10% UTM+痰液
Air-Dryable ™ 1-Step RT-qPCR Mix, 4x
MDX095
50 mL
10,000 个反应
产品亮点 对痰液样本中PCR抑制剂有高耐受性
将小鼠RNA加入到含有10%、5%或0%痰液样本的样品保存液 (UTM)中, 使用可风干一步法RT-qPCR预混液对该样本进 行扩增。结果显示了可风干一步法RT-qPCR预混液(MDX095) 的优异扩增性能,对痰液和样品保存液中的抑制剂表现出高耐 受性。
使用方法
*(反应湿液可以配置放入小瓶、反应板或反应试管中,然后在温控条件下风干)
加入样本复溶 后进行PCR
引物探针
可风干qPCR预混液
风干
Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Blood |
应用:
• 可直接从全血、血清和血浆样本中直接扩增的抗 抑性预混液 • 减少样本处理过程,免去核酸提取步骤
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
1,000 个反应
Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Blood, 4x
MDX092
50 mL
10,000 个反应
产品亮点
血清
血浆
对含有抗凝剂的血浆、血清和全血样 本的高效扩增 将含有EB病毒的质粒DNA加入到10%血清或 10% K2-EDTA血浆中,使用可风干血液直扩 qPCR预混液MDX092( 蓝色 )、Probe Force( 橙 色 )和TaqPath ProAmp( 红色 )的试剂盒进行三 重扩增。结果显示,与对比试剂R和T相比, 可风干血液直扩qPCR预混液MDX092具有更 高的荧光强度和灵敏度。
干燥后的MDX092 | Probe Force | TaqPath ProAmp
Air-Dryable ™ Direct RNA/DNA qPCR Blood |
应用:
产品亮点
产品
产品编号 体积 反应数
对含有抗凝剂K2-EDTA的血浆、血清 和全血样本的高效扩增 对含有5% K2-EDTA血液或5% K2-EDTA血 浆样本分别使用可风干血液直扩RT-qPCR 预混液MDX121( 红色 )、Probe Force( 绿色 ) 和TaqPath ProAmp( 黑色 )的试剂盒对登革 热病毒进行扩增。结果显示,可风干血液 直扩RT-qPCR预混液比供应商Q和T的对比 试剂具有更高的多重扩增能力。
5 mL
1,000 个反应
Air-Dryable ™ Direct RNA/ DNA qPCR Blood
MDX121
50 mL
10,000 个反应
血液
血浆
干燥后的MDX121 | Probe Force | TaqPath ProAmp
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风干
Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Saliva |
应用:
• 可直接从痰液或唾液样本中直接扩增 • 减少样本处理过程,免去核酸提取步骤
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
1,000 个反应
Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Saliva
MDX130
50 mL
10,000 个反应
产品亮点
对唾液样本(最高 60%)或UTM (最高 35%)的多重灵敏检测
在分别含有0% ( 黑色 )、10% ( 红色 )、20%( 蓝色 )和60%( 灰色 )的人体唾液中,通过三重qPCR检测肺炎支原体基因组DNA、腺病毒 (ADV)和巨细胞病毒(CMV)。结果显示,可风干唾液直扩DNA qPCR预混液的扩增性能不受样本中抑制物浓度增加的影响。
肺炎支原体
ADV
CMV
0% 唾液 | 10% 唾液 | 20% 唾液 | 60% 唾液
Air-Dryable ™ Direct RNA/DNA qPCR Saliva |
应用:
产品亮点
产品
产品编号 体积 反应数
对唾液样本(最高60%)或UTM (最高35%) 的多重灵敏检测
5 mL
1,000 个反应
Air-Dryable ™ Direct RNA/DNA qPCR Saliva
MDX131
50 mL
10,000 个反应
对含有35%UTM拭子样本中的3种呼吸道病原体(甲型流感、MERS-CoV和RSV)进行多重扩增。 结果显示,可风干唾液直扩RT- qPCR预混液( 蓝色 )与TaqPath RT-qPCR试剂( 红色 )或UltraPlex 1-Step Tough Mix( 灰色 )提供的抗抑型试剂相比具有更高的抑制物耐 受性和多重扩增性能。
甲型流感
MERS-CoV
RSV
风干后的MDX131 | TaqPath RT-qPCR | UltraPlex 1-Step Tough Mix
Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Stool |
应用:
• 可直接从粪便样本中直接扩增的抗抑性预混液 • 减少样本处理过程,免去核酸提取步骤
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
1,000 个反应
Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Stool
MDX140
50 mL
10,000 个反应
产品亮点
在粪便样本中抑制物存在时的灵敏多重检测
分别使用可风干粪便qPCR直扩预混液 ( 蓝色 )与Probe Force ( 绿色 )或PerfeCTa qPCR ToughMix ( 灰色 ) 在 2 mg/mL胆盐存在的情况下对粪 便样本中的大肠杆菌O157 (维罗毒素基因), 鼠沙门氏菌(16S-23S rRNA基因内转录间隔体)和空肠弯曲菌(16S-23S rRNA基因内转录间隔 体) 直接进行三重扩增。结果显示,与对比试剂相比相比,可风干粪便直扩 qPCR预混液的扩增性能没有受到粪便样本中胆盐的抑制影 响。
大肠杆菌 0157
鼠伤寒沙门菌
Campylobacter jejuni
风干后的MDX140 | Probe Force | PerfeCTa qPCR ToughMix
Air-Dryable ™ Direct RNA/DNA qPCR Stool |
应用:
产品亮点
产品
产品编号 体积 反应数
在粪便样本中抑制物存在时的灵敏多重检测
5 mL
1,000 个反应
Air-Dryable ™ Direct RNA/DNA qPCR Stool
MDX141
50 mL
10,000 个反应
分别使用可风干粪便RT-qPCR直扩预混 液( 蓝色 )与TaqPath 1-Step RT-qPCR 试剂 ( 红色 ) 或UltraPlex 1-Step ToughMix ( 灰色 )在2 mg/mL胆盐存在 的情况下对粪便样本中的2个RNA靶标 (轮状病毒和诺如病毒)和2个DNA靶 标(腺病毒和空肠弯曲菌)直接进行四 重扩增。 结果显示,与对比试剂相 比,可风干粪便直扩RT-qPCR预混液的 扩增性能没有受到粪便样本中胆盐的抑 制影响。
轮状病毒
腺病毒
诺如病毒
空肠弯曲菌
风干后的MDX141 | TaqPath 1-Step RT-qPCR | UltraPlex 1-Step ToughMix
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风干
Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Urine |
应用:
• 可直接检测尿液样本中低浓度细菌和无细胞核酸 • 减少样本处理过程,免去核酸提取步骤
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
1,000 个反应
Air-Dryable ™ Direct DNA qPCR Urine
MDX150
50 mL
10,000 个反应
产品亮点
对尿液样本高效多重扩增
淋病奈瑟菌
沙眼衣原体
B族链球菌
风干后的MDX151 | Probe Force | PerfeCTa qPCR ToughMix Q
分别使用风干后的可风干尿液直扩qPCR预混液 ( 红色 )、KAPA PROBE FORCE ( 绿色 ) and PerfeCTa qPCR ToughMix ( 灰色 )对25%人体尿 液样本中的淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和B族链球菌(GBS)靶标进行三重扩增。结果显示,与对比试剂相比,干燥后的可风干尿液直扩 qPCR预混液对25%人体尿液样本具有更高效的多重扩增和灵敏度。
Air-Dryable ™ Direct RNA/DNA qPCR Urine |
应用:
产品亮点
产品
产品编号 体积 反应数
对尿液样本高效多重扩增
5 mL
1,000 个反应
Air-Dryable ™ Direct RNA/DNA qPCR Urine
MDX151
50 mL
10,000 个反应
登革热
寨卡
基孔肯雅热
风干后的MDX151 | Reliance 1-Step Multiplex RT-qPCR Supermix | UltraPlex 1-StepToughMix
分别使用风干后的可风干尿液直扩RT-qPCR预混液 ( 红色 ) 、Reliance 1-Step Multiplex RT-qPCR Supermix ( 绿色 ) 和 UltraPlex 1-StepToughMix ( 灰色 ) 对10% 人体尿液样本中的 3种病毒RNA(登革热、寨卡、基孔肯雅热)进行三重扩增。 结果显示,与对比试剂相比,干燥后的可风干尿液直扩RT-qPCR预混液对10%人体尿液样本具有更高效的多重扩增和灵敏度。
Air-Dryable ™ DNA LAMP Mix |
应用:
• 更快速-可节省一半的时间 • 完整即用型配方,适用于DNA或RNA靶标的 LAMP扩增-只需要添加特定的引物和探针 • 适用于POC诊断平台或自动化高通量平台 • 4x浓度,反应形式更灵活(液体或风干)
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
800 个反应
Air-Dryable ™ DNA LAMP Mix
MDX110
50 mL
8,000 个反应
产品亮点
提供市面上最快速、灵敏的反应-只要其他同类试剂一半的时间
40 30 20 10 0
将可风干RT-LAMP 预混液与登革热2型RNA引物共同在50°C 风干80分钟。分别使用风干后的反应混合物( 红色 )与新鲜配 置的液体体系( 蓝色 ) 和NEB WarmStart®的液体试剂( 橙色 )扩 增连续稀释的登革热2型靶标 RNA,进行灵敏度测试比较。 反应条件为65°C,60分钟,TTR为达到荧光阈值的时间。误 差条代表的是4次技术重复的标准偏差。结果显示,无论是 液体还是风干后,可风干RT-LAMP预混液的反应速度是 NEB WarmStart®的2倍。
1.5 ng0
.3 ng0
.033 ng
3 ng
风干后的MDX119 | MDX119 液体体系 | NEB WarmStart®
Air-Dryable ™ RNA/DNA LAMP Mix |
应用:
产品亮点
产品
产品编号 体积 反应数
反应特异性更高
5 mL
800 个反应
Air-Dryable ™ NA/DNA LAMP Mix
MDX118
50 mL
8,000 个反应
使用可风干RT-LAMP预混液(MDX118) ( 蓝色 )与NEB WarmStart®的液体试剂( 橙 色 )分别对EBV DNA (1000 ipc)和MS2 RNA (1000 ipc)进行扩增。反应条件为 65° C,60分钟,TTR为达到荧光阈值的 时间。误差条代表的是3次技术重复的标 准偏差。结果显示,与NEB WarmStart® 相比,可风干RT-LAMP预混液反应速度 更灵敏,TTR更短,特异性更高,没有 非特异性扩增。
EBV-DNA
MS2-RNA
MDX118 | NEB WarmStart®
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冻干
• 含有专门冻干赋形剂的即用型、无甘油qPCR预混液 • 适用于多重检测或者自动化高通量设备 • 可兼容各种冻干模式生成粉状或粒状的冻干制品 产品特点
Lyo-Ready™ qPCR Mix | 应用:
• 适用于低拷贝靶标的多重灵敏检测 • 病毒样本预混液(产品编号#MDX062),用于从提 取的或者完整病毒样本中扩增具有高度二级结构的 RNA和DNA病毒
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL 500 个反应 100 mL 10,000 个反应 500 个反应 100 mL 12,500 个反应 4 mL
Lyo-Ready ™ qPCR Mix
MDX021
Lyo-Ready ™ qPCR Mix 2.6x MDX023
产品亮点 强大的多重反应性能 使用可冻干qPCR预混液,采用四重qPCR探针检测法对从合成的DNA模板中以同等扩增效率扩增出巨细胞病毒(CMV), 腺病毒, 和EB病毒(EBV)三种病毒序列以及DNA提取质控。
CMV
EBV
Adenovirus Amplification Plot
DNA Extraction Control
Amplification Plot
Amplification Plot
Amplification Plot
Cycle
Cycle
Cycle
Cycle
Lyo-Ready ™ 1-Step RT-qPCR Mix | 应用:
产品
产品编号 体积 反应数
产品
产品编号 体积 反应数
10 mL
1,000 个反应
10 mL
1,000 个反应
Lyo-Ready ™ 1-Step RT-qPCR Mix
Lyo-Ready ™ 1-Step RT-qPCR Virus Mix
MDX024
MDX062
100 mL 10,000 个反应
100 mL 10,000 个反应
产品亮点 适用于DNA和RNA模板的高灵敏度扩增
Adenovirus Rotavirus A
对于灭活的轮状病毒A(dsRNA)和腺病毒(dsDNA)病毒 裂解物的单次多重RT-qPCR扩增。结果表明两种病毒都以高 灵敏度扩增,从而证明了可冻干一步法RT-qPCR预混液能够 同时从单一样品中检测低拷贝数RNA和DNA多重靶标。
Cycle
使用方法
冻干过程中的关键步骤
固态冷冻溶液
粉状或粒状的冻干制品
孔板,反应管和排管 装满溶液固
冷冻溶液在真空下经过第一次(升 华) 和第二次 (解吸) 干燥过程
Lyo-Ready ™ LAMP Mix | 应用:
• 适用于POCT诊断平台或高通量自动化平台 • 专门为LAMP检测优化的即用型预混液配方 • 4x浓度的预混液 • 含有专门的冻干辅料
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
800 个反应
Lyo-Ready™ LAMP Mix
MDX097
50 mL
8,000 个反应
产品亮点 对低拷贝样本具有更高的灵敏度
使用可冻干 LAMP预混液( 橙色 )和Isothermal Mastermix( 棕色 )和NEB WarmStart® ( 蓝色 )分别对连续10倍稀释的BRCA1基因进行扩增 (1000、100和10拷贝)比较平均样本应答时间TTR。结果表明,与其他供应商相比,可冻干 LAMP预混液具有更高的灵敏度和可重复 性,样本应答时间TTR更快,重复样本间的标准偏差SD也更小。 反应设置为65℃ 60分钟。
MDX097 | Isothermal Mastermix | NEB WarmStart®
20
15
10
5
0
1,000 copies
100 copies
10 copies
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冻干
Lyo-Ready TM RT-LAMP 1-Step Mix |
应用:
产品亮点
产品
产品编号 体积 反应数
在有抑制物存在时反应也更快速更灵敏
5 mL
800 个反应
Lyo-Ready TM RT-LAMP 1-Step Mix
MDX108
50 mL
8,000 个反应
B) 唾液 60
A) UTM 和痰液
60
50
50
40
40
30
30
20
20
10
10
0
0
0% UTM + 痰液
10% UTM + 痰液
20% UTM + 痰液
0% 唾液
20% 唾液
25% 唾液
MDX108 |
使用可冻干RT-LAMP 1-Step( 橙色 )和NEB WarmStart® ( 蓝色 )分别对含有不同浓度的 (A) UTM+痰液和(B)唾液的粗裂解样本中登革热 2型RNA靶标进行扩增。 65°C反应60min。TTR为荧光强度超过最大荧光值10%的阈值的时间。结果表明,与NEB WarmStart® 相比, 即使在有高浓度抑制物的UTM、痰液和唾液中,可冻干RT-LAMP 1-Step Mix的平均TTR也更快,反应更灵敏。
DNA 聚合酶
热启动聚合酶(无甘油) |
应用:
• 适合于需要高特异性的多重、高通量的病毒检测 • 无激活步骤,反应时间可缩短至15分钟 • 方便于室温下设置反应
产品
产品编号 体积 反应数
Aptamer Taq HS (glycerol free) (50 U/μL)
20 µL
50 mL
MDX015
• 高酶浓度(50 U /μL),可兼容冻干 (室温下设置干燥的扩增混合物)
500 µL
500 mL
产品亮点 快速热启动
无甘油Aptamer Taq热启动聚合酶与抗体热启动Taq的qPCR性能比较:分 别在有无初始高温活化2分钟的PCR 反应中对比反应的Ct值。结果显示, 无甘油Aptamer Taq热启动聚合酶反应的Ct值无差异。相比之下,抗体热 启动Taq在2 min高温变性反应中Ct值较低,表明其性能优于无激活时的反 应。总的来说,该数据显示无甘油AptamerTaq聚合酶可以更快速被激 活,允许反应更迅速。
Condition
Glycerol-Free Taq HS 50 U/µL |
应用:
• 可冻干DNA聚合酶,适用于自动化高通量检测 • 单独提供的聚合酶,热启动抗体和酶稀释缓冲液 • 可与可冻干qPCR缓冲液 (产品编号#MDX022) 一起使用开 发可冻干qPCR混合液
产品
产品编号 体积 反应数
20 µL
1,000 个单位
Glycerol-Free Taq HS 50 U/µL
MDX011
500 µL 25,000 个单位
4 mL
1,000 个反应
Lyo-Ready qPCR Buffer 2.5x
MDX022
100 mL 12,500 个反应
产品亮点 无甘油Taq聚合酶新鲜混合液和冻干后的性能比较 以10倍连续稀释的DNA为模板进行两组qPCR检测,其中一组使 用冻干液( 蓝色 ),另一组使用湿液( 黑色 )。 结果显示,无甘 油Taq聚合酶的冻干对qPCR的检测质量没有影响,两组检测都显 示了相同的扩增效率和灵敏度。
Cycle
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