Bst DNA Polymerase CN

Bst DNA聚合酶

适用于环介导等温DNA扩增(LAMP)

主要应用

环境检测

人体诊断

动物诊断

食品检测

水质检测

DNA 标记

产品

产品编号 体积

Bst DNA聚合酶是一种来源于硬脂酸杆菌 (Bacillus stearothermophilus)的DNA聚合酶I, 具有5’- 3’的DNA聚合酶活性和强链置换活性, 但缺乏5’- 3’的外切酶活性。强链置换活性使Bst DNA聚合酶能够在恒温条件下合成DNA,是环介导 等温DNA扩增的理想选择。优化的缓冲液可提高扩 增速度、产量、耐盐度以及敏感度。

聚合酶

1 mL 20 mL 20 mL* 80 μL 800 μL 800 μL* 2 mL 100 mL 5 mL 100 mL 5 mL 100 mL 5 mL 100 mL

Bst DNA 聚合酶

MDX012

高浓度无甘油Bst聚合酶 MDX018

酶缓冲液

抗抑性Bst 缓冲液 高性能

MDX019

Bst 反应缓冲液, 10x

MDX076

BST DNA 聚合酶

稀释缓冲液

• 适用于灵活的反应条件,包括高盐度 • 反应快速 • 为环介导等温DNA扩增(LAMP)优化 • 反应缓冲液和稀释缓冲液分开提供,使反应设置更灵活

酶稀释缓冲液, 1x

MDX078

酶稀释缓冲液(10X) 无甘油 MDX080

*只含有酶

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性能高效的缓冲液体系

亮点数据 抗抑性 Bst缓冲液

对痰液样本中含有不同GC含量的靶标有效扩增

抑制剂浓度递增条件下的高效扩增效率

在20%痰液样本中对百日咳杆菌(57% GC)、金黄色葡萄球 菌(33% GC)、疱疹病毒(59% GC)和结核杆菌(65% GC)进 行LAMP扩增。结果显示,相较普通Bst缓冲液,抗抑性Bst 缓冲液扩增效率更高,TTR更快。

分别使用抗抑性Bst缓冲液和普通Bst缓冲液对人唾液中的 hBRCA1基因进行LAMP扩增。结果显示,反应中抑制剂浓 度的增高对抗抑性Bst缓冲液的扩增效率没有影响。

反应中唾液浓度

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

痰液样本中呼吸道病原检测

60

50

40

30

20

10

0

0

百日咳杆菌

金黄色葡 萄球菌

疱疹病毒

结核杆菌

0

2%

10% 20% 30%

抗抑性缓冲液提高Bst酶对样本保存液(UTM)的耐受性

对最终浓度含有5%、20%或40%毛滴虫DNA的样本保存液分别使用抗抑性Bst缓冲液(红色)和普通Bst缓冲液(蓝色)进 行LAMP 扩增。结果显示,相较于普通Bst缓冲液,即使在40%的样本保存液中,抗抑性Bst缓冲液的扩增性能依然很好。

抗抑性Bst缓冲液更高的特异性 使用抗抑性Bst缓冲液(红色)和普通缓 冲液(蓝色)分别对100个DNA拷贝的百 日咳杆菌、金黄色葡萄球菌、疱疹病 毒和结核杆菌进行LAMP扩增。反应 中对阴性对照(NTC)的扩增显示,使 用普通缓冲液总是能显示出阳性扩增 (深蓝色),经过优化后的抗抑性Bst缓 冲液(棕色) 则没有阳性扩增或者扩增 延迟,说明抗抑性Bst缓冲液更高的特 异性。

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Bst 反应缓冲液, 10x

高耐盐性 LAMP反应分别使用迈迪安公司的Bst DNA聚合酶和 供应商B的Bst,在盐浓度(KCl)递增的条件下,使用 制造商推荐的方案进行扩增。结果表明,迈迪安的 BstDNA聚合酶对抑制剂的耐受性与供应商B的Bst相同。 亮点数据

反应快速 LAMP 反应分别用迈迪安的Bst DNA聚合酶(红色)和供应商A(蓝色)、供应商B(绿色)和供应商C(紫色)的Bst进 行LAMP反应,使用各自制造商推荐的方案,扩增不同的靶标。结果表明,迈迪安公司的Bst DNA聚合酶反应始终比其他 Bst更快地达到阈值。

A/ BRCA1 肿瘤抑制基因

B/ 囊性纤维化跨膜受体 (CFTR)

C/ Strongyloides stercoralis (人致病寄生虫)

Time [60 s interval]

Time [60 s interval]

Time [60 s interval]

高度稳定性 Bst DNA聚合酶(A)置于+4°C、环境温度(室温)或+37°C下4小时(蓝色)、24小时(红色)或1周(黄色),并在(B)-80°C至 0°C之间进行5、20和30轮快速冻融。结果表明,迈迪安的Bst DNA聚合酶是非常稳定的,承受温度高达+37°C的1周, 或多达30个冻融周期而不失去活性。MDX018(高浓度无甘油版本)在相同的测试条件下也得到了类似的结果。

B/

A/

12.0 11.0 10.0

12 11 10

9.0 8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0.0

9 8 7 6 5 4 3 2 1 0

+4 o C

室温 储存温度

+37 o C

5

20

30

冻融循环

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