适用于环介导等温DNA扩增(LAMP)
Bst DNA聚合酶
适用于环介导等温DNA扩增(LAMP)
主要应用
环境检测
人体诊断
动物诊断
食品检测
水质检测
DNA 标记
产品
产品编号 体积
Bst DNA聚合酶是一种来源于硬脂酸杆菌 (Bacillus stearothermophilus)的DNA聚合酶I, 具有5’- 3’的DNA聚合酶活性和强链置换活性, 但缺乏5’- 3’的外切酶活性。强链置换活性使Bst DNA聚合酶能够在恒温条件下合成DNA,是环介导 等温DNA扩增的理想选择。优化的缓冲液可提高扩 增速度、产量、耐盐度以及敏感度。
聚合酶
1 mL 20 mL 20 mL* 80 μL 800 μL 800 μL* 2 mL 100 mL 5 mL 100 mL 5 mL 100 mL 5 mL 100 mL
Bst DNA 聚合酶
MDX012
高浓度无甘油Bst聚合酶 MDX018
酶缓冲液
抗抑性Bst 缓冲液 高性能
MDX019
Bst 反应缓冲液, 10x
MDX076
BST DNA 聚合酶
稀释缓冲液
• 适用于灵活的反应条件,包括高盐度 • 反应快速 • 为环介导等温DNA扩增(LAMP)优化 • 反应缓冲液和稀释缓冲液分开提供,使反应设置更灵活
酶稀释缓冲液, 1x
MDX078
酶稀释缓冲液(10X) 无甘油 MDX080
*只含有酶
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性能高效的缓冲液体系
亮点数据 抗抑性 Bst缓冲液
对痰液样本中含有不同GC含量的靶标有效扩增
抑制剂浓度递增条件下的高效扩增效率
在20%痰液样本中对百日咳杆菌(57% GC)、金黄色葡萄球 菌(33% GC)、疱疹病毒(59% GC)和结核杆菌(65% GC)进 行LAMP扩增。结果显示,相较普通Bst缓冲液,抗抑性Bst 缓冲液扩增效率更高,TTR更快。
分别使用抗抑性Bst缓冲液和普通Bst缓冲液对人唾液中的 hBRCA1基因进行LAMP扩增。结果显示,反应中抑制剂浓 度的增高对抗抑性Bst缓冲液的扩增效率没有影响。
反应中唾液浓度
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
痰液样本中呼吸道病原检测
60
50
40
30
20
10
0
0
百日咳杆菌
金黄色葡 萄球菌
疱疹病毒
结核杆菌
0
2%
10% 20% 30%
抗抑性缓冲液提高Bst酶对样本保存液(UTM)的耐受性
对最终浓度含有5%、20%或40%毛滴虫DNA的样本保存液分别使用抗抑性Bst缓冲液(红色)和普通Bst缓冲液(蓝色)进 行LAMP 扩增。结果显示,相较于普通Bst缓冲液,即使在40%的样本保存液中,抗抑性Bst缓冲液的扩增性能依然很好。
抗抑性Bst缓冲液更高的特异性 使用抗抑性Bst缓冲液(红色)和普通缓 冲液(蓝色)分别对100个DNA拷贝的百 日咳杆菌、金黄色葡萄球菌、疱疹病 毒和结核杆菌进行LAMP扩增。反应 中对阴性对照(NTC)的扩增显示,使 用普通缓冲液总是能显示出阳性扩增 (深蓝色),经过优化后的抗抑性Bst缓 冲液(棕色) 则没有阳性扩增或者扩增 延迟,说明抗抑性Bst缓冲液更高的特 异性。
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Bst 反应缓冲液, 10x
高耐盐性 LAMP反应分别使用迈迪安公司的Bst DNA聚合酶和 供应商B的Bst,在盐浓度(KCl)递增的条件下,使用 制造商推荐的方案进行扩增。结果表明,迈迪安的 BstDNA聚合酶对抑制剂的耐受性与供应商B的Bst相同。 亮点数据
反应快速 LAMP 反应分别用迈迪安的Bst DNA聚合酶(红色)和供应商A(蓝色)、供应商B(绿色)和供应商C(紫色)的Bst进 行LAMP反应,使用各自制造商推荐的方案,扩增不同的靶标。结果表明,迈迪安公司的Bst DNA聚合酶反应始终比其他 Bst更快地达到阈值。
A/ BRCA1 肿瘤抑制基因
B/ 囊性纤维化跨膜受体 (CFTR)
C/ Strongyloides stercoralis (人致病寄生虫)
Time [60 s interval]
Time [60 s interval]
Time [60 s interval]
高度稳定性 Bst DNA聚合酶(A)置于+4°C、环境温度(室温)或+37°C下4小时(蓝色)、24小时(红色)或1周(黄色),并在(B)-80°C至 0°C之间进行5、20和30轮快速冻融。结果表明,迈迪安的Bst DNA聚合酶是非常稳定的,承受温度高达+37°C的1周, 或多达30个冻融周期而不失去活性。MDX018(高浓度无甘油版本)在相同的测试条件下也得到了类似的结果。
B/
A/
12.0 11.0 10.0
12 11 10
9.0 8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0.0
9 8 7 6 5 4 3 2 1 0
+4 o C
室温 储存温度
+37 o C
5
20
30
冻融循环
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Sales Manager, China 手机:+86 130 5136 9001 邮件:Sara.Zhou@meridianlifescience.com
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