使用流程
提取前将qPCR提取控制与检测样品一起添加到裂解缓冲液中,监测不良的提取收 率、PCR抑制、不正确的移液或循环参数。
Control mix (includes primer and probes for control) is added to the reaction mixture
qPCR 提取对照
裂解&提取
检测设定
qPCR 结果
可能结果 靶标 内控DNA 解读 1 + +
检测到靶标和内控DNA
检测样本
未检测到靶标,检测到内控DNA, 表明提取成功,qPCR反应成功。
2
-
+
qPCR 提取控制从裂解和提取 开始进行监测
3 4
-
- -
无效结果:靶标及内控DNA均未检出,重新检测。
+
无效结果: 内控DNA未检测出,重新检测。
产品亮点
qPCR 提取控制在监测抑制作用上与添加内控DNA检测相同
从HEK293 细胞里扩增A) Spiked 内控l DNA (绿色)and B) qPCR 提取控制(红色) 。 使用标准的基因组DNA提取试剂盒,用PBS 代替裂解缓冲液或结合缓冲液模拟低效提取。 条件是在95°C 10 s, 60°C 30 s下10分钟。 这两种控制类型在完全裂解步骤(红色), 无裂解(橙色)以及无结合缓冲液(绿色)的 结果是相同的。
A
B
适用于单重或多重反应
A
B
C
从HEK293细胞中扩增 A) β2微球蛋白的片段(ß2MG) 和B)GAPDH基因,以及C)从qPCR提取控制中扩增内控序列。 条件为95°C下10min, 50个循环95°C 10 s, 60°C 30 s。结果表明,该方法单重反应和多重反应的无Ct值差异。
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