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研究 2 唾液特异性预混液显示更强的抗抑性和更快速的扩增性能 续
目的： 比较Air-Dryable™ 唾液直扩RT-qPCR预混液（MDX131）与 Air-Dryable™ 一步法RT-qPCR预混液（MDX095）风干和液 体体系对唾液样本中Flu B的扩增。 方法： FluB样本或采用磁珠法提取RNA（样本IFB-1），或分别使用 100μL的存储缓冲#1（样本IFB-2）、存储缓冲液#2（样本 IFB-3）、裂解液#1（样本IFB-4）或裂解液#2（样本IFB-5） 进行处理。然后这些样本快速涡旋上清液，用健康的人体唾 液将Flu B样本稀释至10 3 或10 4 倍（见表1）。
标准循环：逆转录 55°C x 10 分钟，95°C x 3 分钟，（95°C x 10秒，60°C x 60 秒 ）x 5 个循环，（95°C x 10 秒，60°C x 30秒）x 40个循环）。快速循环：逆转录 55°C x 5 分 钟，95°C x 1 分钟，（95°C x 1 秒，60°C x 15 秒 ）x 5 个循 环，（95°C x 1秒，60°C x 15秒）x 38个循环。 结果： 与Air-Dryable™ 可风干一步法RT-qPCR预混液（MDX095）相 比，Air-Dryable™ 可风干唾液直扩RT-qPCR预混液（MDX131 在快速和标准循环设置中对所有样本的扩增Ct值都更快 （Figure 4）。这说明MDX131对唾液样本中存在的抑制物， 包括在提取核酸中残留的抑制物，都具有更强的耐受性能。
）
样本
样本准备
磁珠纯化提取的Flu B样本稀释至10 3 倍
1
IFB-1-1
磁珠纯化提取的Flu B样本稀释至10 4 倍
1
IFB-1-2
人体唾液稀释10 3 倍的Flu B 样本，用存储缓冲液#1处理
2 IFB-2-1
人体唾液稀释10 4 倍的Flu B 样本，用存储缓冲液#1处理
2 IFB-2-2
人体唾液稀释10 3 倍的Flu B 样本，用存储缓冲液#2处理
3
IFB-3-1
人体唾液稀释10 4 倍的Flu B 样本，用存储缓冲液#2处理
3
IFB-3-2
人体唾液稀释10 3 倍的Flu B 样本，用裂解液#1处理
4
IFB-4-1
人体唾液稀释10 4 倍的Flu B 样本，用裂解液#1处理
4
IFB-4-2
人体唾液稀释10 3 倍的Flu B 样本，用裂解液#2处理
5 IFB-5-1
人体唾液稀释10 4 倍的Flu B 样本，用裂解液#2处理
5 IFB-5-2
NC
DEPC 水
表1. 分别使用Air-Dryable™ 可风干唾液直扩RT-qPCR预混液（MDX131）和Air-Dryable™ 可风干一步法RT-qPCR预混液（MDX095）对人体 唾液样本中的Flu B进行检测。表中描述了不同样本的处理方法。
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