Meridian Blocker Practical Guide - Chinese

免疫阻断剂实用指南 ISO Certified 13485:2016

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推荐的阻断剂

用于消除免疫夹心法干扰的阻断剂

动物IgG –被动阻断剂 • 适用于混种试验(例如, MAb/PAb) • 阻断剂的种类必须与捕获抗体或检测抗体宿 主的种类一致

TRU Block™–主动HAMA & RF阻断剂 • 用于双鼠单克隆试验 • 除去HAMA, HA & RF干扰

TRU Block ™ Ready 8001 TRU Block ™ Ultra 8000 TRU Block ™ A66800H TRU Block ™ 2 A66802H TRU Block ™ 3 A66803H

Interfering HA (e.g. HAMA) TRU Block

小鼠 IgG A66186M (9-13mg/mL) A66185M (50-55mg/mL) A66185M-LY (Lyophilized) A66189M (45-55mg/mL, No Azide)

TRU Block

IgM RF

Detection Antibody (mouse origin) Capture Antibody (mouse origin) Antigen

Blocking Buffer

山羊 IgG A66200H 大鼠 IgG A64391R 兔 IgG A66100H

鸡 IgY A01302C (Lyophilized)

*不同产品的配方其各个专利组分的比例不同,从而赋予各个产 品独特的阻断特性。

绵羊 IgG A66400S (70-77mg/mL, Liquid)

在双鼠单克隆试验中, 需要使用特异性阻断剂来除 去特定类型的HA干扰, 称之为人抗鼠抗体 (HAMA) 和类风湿因子 (RF)。HAMA阻断剂包含一种针对所 有类型异嗜性干扰包括HAMA和RF的特异性粘合剂。 一旦与干扰抗体结合, TRU Block会通过位阻进一步阻 止HA与其它试验成分结合。主动阻断剂的使用浓度通 常低于被动阻断剂, 使一般与被动阻断剂有关的试验信 号减少最小化。

被动阻断剂通过提供替代结合位点阻止干扰抗体与捕获抗体或 检测抗体结合。动物IgG (例如,羊IgG) 只能阻断一种干扰类型 (例如, 人抗羊抗体), 因此通常需要不止一种IgG, 这取决于捕获 抗体和检测抗体的宿主。必须添加过剩浓度的动物IgG, 其效 果取决于干扰抗体与动物IgG的亲和力。

推荐浓度: • 试验所用MAb/PAb浓度的10倍 (例如,如果是 5μg/mL Ab/酶结合物, 则添加50μg/mL动物IgG)。 • 可以添加到样品或酶结合物稀释液中,但是理想上 来说在用试验捕获抗体孵化之前就应该与患者样 品接触。

推荐浓度: 为了获得最佳性能, TRU Block应该作为样品或酶结合物 稀释液的一部分包括在内, 推荐的浓度范围是:

Product

Protein Concentration Application

Single-step dilution with recommended dilution of 1:1000 to 1:10

TRU Block ™ Ready

ELISA & LF

TRU Block ™ ULTRA Range: 24-26 mg/mL ELISA, CLIA & LF TRU Block ™ Range: 24-26 mg/mL ELISA & CLIA TRU Block ™ 2 Range: 24-26 mg/mL CLIA & LF TRU Block ™ 3 24.3 mg/mL ELISA

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用于消除IgM捕获试验干扰的阻断剂

IgG吸附剂 IgG吸附剂是纯化的羊抗人IgG (GAH IgG Fc) Fc片断, 用 于在ELISA或其它免疫分析检测特异性IgM抗体之前从血清 中除去人IgG宋体IgG/类风湿因子 (RF) 复合物。已证明除 去IgG干扰能够显著增加免疫分析检测IgM的灵敏度。 -Meridian的IgG吸附剂是用免疫电泳法检测的, 以确保 IgG特异性和不与IgM或IgA交叉反应。羊抗人IgG (GAH IgG Fc)L15406G。

推荐的试剂: L15406G Goat anti-human IgG Fc (GAH IgG Fc) 在添加到患者样品之前稀释。推荐与 PBS按照1:10稀释。 按照1:10添加到患者样品中, 并孵 化5-30分钟。

IgM检测稀释液 IgM检测稀释液预期用于检测IgM抗体的定性和定量试验。 该稀释液旨在减少患者 IgG抗体、类风湿因子、异嗜性抗 体和会影响免疫分析结果的其它非特异性蛋白给试验带来 的干扰。 IgM检测稀释液中的阻断蛋白是过量的, 将与检 测固相上的任何开放结合位点结合以防止与干扰因子结合。 作为检测试剂盒的一部分时, IgM检测稀释液能够增加IgM 检测试验的灵敏度。

推荐的试剂: 8120

IgM Assay Diluent 在单独的试管中, 按照1:21或更大比例用IgM 检测稀释液稀释患者血清样品(混合均匀)。 稀释液必须用其它检测成分标准化。

固相封闭剂封闭剂缓冲液

J82100B - ELISA Blocking Buffer (PBS, pH7.4) J82300B - Lateral Flow Blocking Buffer (PBS, pH 7.4) • 不是基于哺乳类的阻断剂 • 阻断与固相底物的非特异性结合以提高检测灵敏度 • 使微孔板/膜上的结合蛋白稳定 • 增加信噪比 • 在原倍 (1x) 浓度或进一步稀释后使用

J16430D - Coating Stabilizer and Blocking Buffer • 提高抗原/蛋白与固相结合的稳定性和功能 • 完美适用于非常不稳定的蛋白或没有那么不稳定的抗原/蛋 白。与该试验当前的阻断剂按照1:1稀释。 • 缓冲液pH 7.2 ± 0.2 A64801B - Bovine Serum Albumin (BSA) • 完美适用于酪蛋白敏感抗体,比如磷特异性抗体 • 可用于ELISA、Western blot和IHC • 在pH 7、PBS 1-5%浓度时使用 • 冻干

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推荐的阻断剂

同型对照在流式细胞术和免疫组化试验中用作阴性对照, 可区分非特异性背景 信号与特异性抗体信号。另外, 人免疫球蛋白可用于测量患者样品中的免疫球 蛋白/同型的种类, 作为标准的阻断剂或作为蛋白包被剂用于包括免疫荧光、 免疫细胞化学、蛋白质印迹 (Western blot) 和酶联免疫吸附测定 (ELISA)。 同型对照&其它阻断剂

推荐的试剂: 人 IgG • A50170H, IgG

小鼠 IgG • A66186M, IgG • A31171H, IgG1, kappa • A01696M, IgG2a, kappa IgA • A03090M, IgA, kappa

IgM • A32169H, IgM • A99850H, IgM • A50168H, IgM • A50713H, IgM (mu Chain) • A50591H, IgM Fc5u

IgM • A03169M, IgM, kappa

• A50175H, IgG (Fc) • A50177H, IgG (Fab) • A50183H, IgG1, kappa • A50184H, IgG2, kappa • A01384H, IgG3 • A01241H, IgG4, kappa

IgE • A03900M, IgE

IgE • A50384H, IgE

• A01235H, IgE, kappa • A01268H, IgE, kappa • A75671H, IgE, kappa & lambda

IgA • A50167H, IgA

大鼠 IgG • A64391R, IgG

绵羊 IgG • A66400S, IgG

• A50166H, IgA1, kappa • A50165H, IgA1, lambda • A50555H, IgA2, kappa

同型对照是对目标抗原缺乏特异性的一级抗体(一抗), 但是与应用中使用的一级抗体的类与型相符。它们通过阻断Fc受体与细 胞蛋白、糖类和脂类结合或非特异性蛋白与之相互作用来减少一抗/捕获抗体的非特异性结合。同型对照抗体应该与一抗/捕获 抗体的宿主种类、同型(包括重链 (IgA, IgG, IgD, IgE或IgM) 和轻链 (kappa或 lambda) 类型)相符, 如果相关, 酶结合物也 要相符。此外, 同型对照应该在一级抗体的相同浓度下使用。

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ELISA和LF试验使用阻断剂来减少患者样品中可导致错误结果和不正确诊断的蛋白干扰。 为什么使用阻断剂?

选择最佳的试验形式取决于试验的预期应用, 待分析的样 品类型, 试剂的可获得性以及该试验预期用于一个实验室 的单个分析还是由各种技术人员在很多实验室使用。一般 来说, 免疫分析分为以下几类: • 夹心抗原检测 ELISA - 用于测量目标抗原/分析物的数量 • 抗体捕获 ELISA - 用于筛查特异性靶标的抗体 (例如:lgG,、lgM,、lgA, & lgE) • 竞争性ELISA - 用于检测样品中存在的抗原/分析物, 并且通常用于只有 1-2 个表位的小抗原 在所有试验形式中有几个对检测性能至关重要的常见参数: (1) 固相的选择 (2) 抗体/抗原的选择和 (3) 阻断剂的选择。 为了使一个试验同时具有高灵敏度和特异性,最关键的因素是 选择对目标分子具有高度特异性的抗体或抗原。但是, 使用阻 断剂也有可能提高试验的灵敏度和特异性。这些阻断剂的功 能是减少使信噪比增加的非特异性结合。 试验中的非特异性相互作用可发生在 (1) 固相与非靶定蛋白 之间, 其吸附在固体底物的表面 (2) 试验本身包含的抗体与患 者样品存在的内源性抗体之间。为了防止非特异性结合, 在固 相包被步骤之后使用封闭缓冲液以阻断所有剩下的开放结合 位点。在样品制备过程中使用其它阻断剂来防止干扰抗体与 试验抗体成分结合。

免疫分析固相的类型

材料

结合力

反应类型

硝化棉 PVDF

高 高 高 低 低 低

疏水,亲水

疏水 疏水

尼龙

板材及管材

聚苯乙烯

疏水 疏水

聚乙烯

衍生化酶标板

共价, 疏水, 亲水

珠类

聚苯乙烯

疏水

衍生化聚苯乙烯 高

共价, 疏水, 亲水

微粒

共价, 疏水

具有较高的结合能力又对固定抗原或抗体的天然蛋白构 象没有损害的固体表面是最合适的。

单克隆抗体与多克隆抗体之间的关键性能差异

一般来说, 通常选择 MAb 作为一级抗体来建立最高水平的检测特异性, 而选择 PAb 作为二级抗体(二抗)以通过多次结合事 件来增强信号。但是, 任何组合都可以使用。所有候选抗体必须与预期的样品类型一起检测, 从而选出具有最佳性能的抗体。

单克隆抗体 (MAb) • 一般在小鼠中产生或重组, 识别单 一表位。 • 既然只有一个抗体分子可与抗原结 合, 那么其间的相互作用是高度特 异的, 但是可缺乏灵敏度, 这取决于 亲和常数。

多克隆抗体 (PAb) • 在山羊、绵羊、小鸡、小兔和其它动物中产生。 • 多克隆血清是抗体的异质复合物, 具有独特的特异性。该特异性抗体 (PAb)) 的浓度通常在 50-200mg/mL。 • PAbs 能够识别任何一个抗原上的多个表位, 这使它们对抗原突变没有那么敏感。 • 在不太了解抗原的性质时 PAbs 很有用。但是, 它们的数量在宿主动物的寿命内 是有限的。

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需要阻断剂的免疫分析形式

夹心抗原检测免疫分析

这种灵敏而稳健的方法可以捕获两个抗体(捕获抗体和检测抗体)之间的目标抗原。捕获抗体与固相结合。应用含抗原的样品 后执行清洗步骤以除去未结合的抗原。添加的检测抗体直接与抗原结合。捕获抗体和检测抗体必须与抗原上的非重叠表位结合。 单克隆抗体或亲和纯化的多克隆抗体都可用作捕获和检测抗体。可以用酶结合的检测抗体(直接检测)或一组匹配的未标记检 测抗体和酶结合的二级抗体(间接检测)测量抗原。

检测 抗体 二级 抗体

探测 标签

探测 标签

检测 抗体

捕获 抗体 抗原

捕获 抗体 抗原

直接检测

间接检测

抗体检测试验 (IgG, IgM & IgA)

抗原通过直接吸附固定在固相上。应用含抗体的样品后执行清洗步骤。然后用酶结合的检测抗体(直接检测)或一组匹配的未 标记检测抗体和酶结合的二级抗体(间接检测)测量抗体。直接检测如下所示

探测 标签

检测 抗体

探测 标签

检测 抗体

病人IgG 抗体

病人 IgM 抗体

抗原

抗原

IgG 检测

IgM 检测

竞争性试验

该试验是指患者的目标分析物与标记抗原(抑制剂抗原)之间 的竞争性结合过程。将目标分析物的特异性抗体包被在固相 上。患者样品和标记的抑制剂抗原通过预先包被的抗体孵化并 竞争结合位点。未结合的标记抗原/分析物经过清洗步骤除 去。样品中的分析物越多, 与抗体结合的标记抑制剂抗原就越 少。因此, 试验信号越弱, 患者样品中的分析物浓度就越高。 该方法常用于只有 1-2个表位的小抗原。

探测 标签

病人 分析物

抑制剂 抗原

捕获 抗体

直接检测

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固相定量免疫分析比如ELISA、层析法和Western blot(蛋白质印迹)都是将抗体固 定于一个表面。其它蛋白质或生物分子与该表面的非特异性结合会降低试验的特异性 和灵敏度。固相阻断剂专门用于使未被结合的结合位点饱和, 从而防止非特异性结合, 同时增加检测灵敏度。 阻断固相

在开发一种新的免疫分析时, 第一步就是优化固相上的抗 原或捕获抗体包被条件以使包被的蛋白质数量最大化。 包被完成后, 必须阻断所有剩下的未被结合的结合位点以防 止后续反应物的非特异性结合。理想的阻断剂通常基于蛋 白质, 因为它既能阻断固相上的疏水位点又能阻断固相上 的亲水位点。另外, 蛋白质在固相表面反应时它还可以作 为稳定剂和防止变性作用。必须优化每个试验的阻断剂浓 度和阻断时间长短。使用数量不足的阻断剂会导致背景过 剩和信噪比减小。使用过量浓度的阻断剂可能掩盖抗体抗 原相互作用, 导致灵敏度降低。

理想的阻断剂具有以下特征: • 有效地阻断试验反应物与微孔表面的非特异性结合 • 不会破坏已吸附到微孔的试验成分的结合 • 充当固相上试验反应物的稳定剂(防止变性作用) • 不与其它试验反应物发生交叉反应 • 不具备可能导致底物信号产生或反应物降解的酶活性 • 各批次间性能如一

有封闭缓冲液的ELISA 封闭缓冲液用于与固相上的开放位点结合, 避免未结合碎片的 非特异性结合

没有封闭缓冲液的ELISA 未结合的碎片比如蛋白质、患者样品中的干扰分子、和试验反 应物与固相结合并与特异性抗原-抗体反应产生竞争,导致背景 噪音和特异性试验信号减少。

探测 标签

探测 标签

检测 抗体

检测 抗体

未结合碎片

抗原

抗原

阻断缓冲液

捕获 抗体

捕获 抗体

一般阻断方案

1. 用一级抗体包被固相后,直接将封闭液添加到微孔、微珠、印迹膜或 硝酸纤维膜。 2. 确定试验的最佳阻断剂浓度。阻断剂可以在原倍浓度或稀释后使用。 3. 确定最适宜的孵化温度和时间以正确吸附阻断剂。较长的孵化时间和 较高的温度将使阻断率升高。通常在 25°C - 30°C 温度下孵化 30 分钟到 2 小时。 4. 执行清洗步骤。

备注: 除了阻断以外, 对每一步进行彻底清洗也 是必不可少的。清洗步骤是除去未结合的试剂 和减少背景噪音必须的。清洗不充分将导致背 景较高。常见的技术是使用稀释后的封闭缓冲 液和添加一些高纯度的清洁剂。

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阻断检测干扰

免疫分析干扰是对通过导致假阳性或假阴性测试结果而改变试验结局的物质的总称。 例如, 潜在干扰颗粒包括患者样品中存在的内源性抗体或其它结合蛋白, 多反应性抗 体或自身抗体(异嗜性)以及人抗动物抗体。 免疫分析干扰的背景信息

在免疫分析中,干扰物质通过以下任一方式产生破坏分析物与试剂 抗体之间反应的非特异性反应: (1) 在与待测分析物竞争结合试验抗 体中胜出(假阴性)或 (2) 在没有任何分析物的情况下同时与试验的 捕获抗体和检测抗体结合(假阳性)。 内在易受干扰影响的试验包括双夹心抗原检测试验,竞争性试验和 lgM捕获试验。文献中已报道的具体例子有ToRCH、CEA、CA-125 、CKMB、LH、FSH、催乳素、TSH、AFP、心脏肌钙蛋白I (cTnl) 和 hCG等试验。 夹心法和竞争性试验中最常见的干扰类型是异嗜性抗体(HA,), 这种抗体是自然生成的亲和力较低的人抗体,可与不同物种的免疫 球蛋白发生反应, 包括小鼠、山羊、小兔、绵羊和小鸡。在诊断试 验中,HAs能够与多个看似不相关的表位结合来破坏试验的特异性 抗原抗体作用。 人抗鼠抗体 (HAMA) 是其中一种HA干扰, 与小鼠抗体特异性结合。 由于商用诊断免疫分析较多使用小鼠单克隆抗体, 所以 HAMA 干扰是 最多见的一种类型。类风湿因子((RF))是一种自身抗体, 可与患者自己 的免疫球蛋白((Ig))发生反应, 也可能与动物 Ig 交叉反应导致“RF 干扰” , 这与 HA/HAMA 干扰类似。一般来说, 同型((Fc区) 特有的 干扰HA比个体遗传型((Fab或结合位点)特有的HA更常见。 lgM 捕获试验一般有两种干扰。第一种来自高水平的患者lgG抗体, 与lgM 竞争固相上的抗原结合位点。由于 lgG 抗体非常丰富, 约代表 了人血清抗体的 75%,因此它们凭借绝对数量优势在竞争中胜过 lgM。 第二种干扰是由lgM RF导致, 通过与免疫球蛋白上的Fc片断反应而 产生假阳性信号。RF见于 1%-4% 的普通人群和 75% 的 65 岁以上成人患者。

真正的阳性结果

检测 抗体

抗原

阻断缓冲液

捕获 抗体

假阴性

阻断缓冲液

干扰的抗体阻断捕获或检测抗体的结 合位点。通常发生在免疫夹心法和竞 争法分析。

假阳性

干扰抗体 (HA 干扰)

阻断缓冲液

干扰的抗体在没有抗原的的情况下 和捕获抗体和检测抗体结合。通常 只发生在免疫夹心法测定。

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夹心免疫分析干扰

夹心免疫分析使用两种抗体(单克隆或多克隆抗体)来结合抗原或待测分析 物上的不同位点。捕获抗体对抗原的结合亲和力通常是免疫分析灵敏度的主 要决定因素。但是, 人抗动物免疫球蛋白抗体(HA抗体)会干扰这一相互作 用并降低检测灵敏度和特异性。

单抗多抗混合使用夹心法

双单抗夹心法

例如:山羊, 羊, 兔, 大鼠, 鸡, 小鼠

检测抗体

小鼠单抗 抗原 小鼠单抗

抗原 捕获抗体

阻断缓冲液

阻断缓冲液

例如:小鼠, 鸡, 兔, 山羊

对于混种夹心试验, 使用的 IgG 阻断剂必须与捕获和检测 抗体具有相同的宿主。如果夹心试验使用了两种不同的抗 体种类, 则需要一种以上的 IgG。

对于双鼠单克隆抗体夹心试验, 除了主动HAMA阻断剂(TRU Block) 还应该使用小鼠 IgG 来除去特定种类的HA干扰, 称之为人抗鼠抗体 (HAMA)和类风湿因子(RF)。

IgM 捕获试验的干扰

IgM 抗体是免疫系统响应感染而产生的第一种抗体。因此, 已证实lgM检测试验是很有 价值的诊断工具, 有助于鉴别早期和近期感染。然而, lgM 抗体在体内所有抗体中只占 5%-10%。相比之下, lgG 抗体是最丰富的免疫球蛋白, 约占 75%-80%。为了确保 lgM 试验同时具有高灵敏度和特异性, 有必要减少试验干扰, 尤其是来自更加丰富的 lgG 抗 体和其它非特异性蛋白的干扰, 比如类风湿因子(RF)。

山羊抗人 IgG or IgM Diluent

病人gG

检测抗体

探测 标签

病人IgM

抗原

IgM Capture Assay

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产品列表 缩写表

Ab

抗体

IgM

免疫球蛋白M 免疫球蛋白Y

Aff. Pur.

亲和纯化 阻断试剂

IgY

Block

LF

测流

BSA

牛血清清蛋白

MAb 单抗 Monospecific 免疫电泳是单特异性 Neat

EIA, ELISA

酶联免疫

Fc

抗体片段可结晶区域

完整、未纯化、未稀释的抗血清

H&L

IgG 重链和轻链 异嗜性抗体 人抗小鼠抗体 辣根过氧化物酶

Neph

浊度测定

HA

PAb

多抗

HAMA

PBS

磷酸盐缓冲盐水

HRP

Purified

有关净化和/或使用过程的程度,请参阅 产品COA

IEP

免疫电泳

TIA Tris

比浊法

IgA IgE IgG

免疫球蛋白A 免疫球蛋白E 免疫球蛋白G

三(羟甲基)氨基甲烷缓冲液三(羟甲基)氨 基甲烷缓冲液

动物血清 动物血清包含多种多样的蛋白质混合物, 能吸附各种试验中的异嗜性干扰因子。可以用动物血清代替动物 IgG, 或者除了动物IgG以外再使用动物血清。动物血清与试验抗体试剂的种类必须相同。

特异性

产品编号 N21010B N01262C N82800F N66001G N66111G N21010H N14010M N64250P N66010R N01267R N64110A N21010S

来源

格式

Bovine Serum, Sterile Filtered

Bovine Canine

Neat

Canine Plasma, Pooled/Mixed Gender, Unfiltered, Non-Sterile (Heparin)

Plasma

Fish Serum (cell culture grade) Goat Serum, Sterile Filtered

Fish

Neat Neat Neat Neat Neat Neat Neat Neat Neat Neat

Goat Goat Horse

Goat Serum, Sterile Filtered and Heat Inactivated

Horse Serum, Sterile Filtered

Mouse Serum, Filtered

Mouse

Porcine Serum, Sterile Filtered

Pig

Rabbit Serum

Rabbit Rabbit

Rabbit Serum, Sterile Filtered and Heat Inactivated

Rat Serum, Filtered

Rat

Sheep Serum, Sterile Filtered

Sheep

免疫阻断剂实用指南

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鸡免疫球蛋白 使用鸡抗体的夹心或竞争性ELISAs或层析试验应该使用鸡 Igs。患者样品中可潜在干扰试验信号的任何人抗鸡抗体均可与鸡 IgY 结合, 避免将干扰试验结果的非特异性结合。

特异性

产品编号 来源

格式

IgY, Chicken IgY, Chicken IgY, Chicken

A01366C Chicken Eggs

Purified

A01460C Chicken Serum Purified A01302C Chicken Serum Purified

山羊免疫球蛋白 使用山羊抗体的夹心或竞争性 ELISAs 或层析试验应该使用山羊 Igs。患者样品中可潜在干扰试验信号的任何人抗羊抗体均可与 山羊 Ig 结合, 避免将干扰试验结果的非特异性结合。

特异性

产品编号 来源

格式

IgG, Goat-Differential ppt

A66200H

Goat Serum Purified

人免疫球蛋白 人 Igs 可用于流式细胞术、IHC(免疫组化)、夹心或竞争性 ELISAs 或层析试验来阻断非特异性结合。选择的抗体应该与一抗/ 捕获抗体的宿主种类、同型(包括重链(IgA, IgG, IgD, IgE 或 IgM)和轻链(kappa或 lambda)类型)相符,如果相关, 酶结 合物也要相符。

特异性

产品编号 来源

格式

IgE, kappa IgE, lambda

A01268H A01720H A75671H A50183H A50184H A01241H A32169H A50591H A50166H A50165H A50555H A50167H A50170H A50177H A50175H A01384H A50713H A50168H

Human Myeloma Neat Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Myeloma Purified Human Plasma Purified Human Plasma Purified Human Plasma Purified Human Plasma Purified Human Plasma Purified Human Plasma Purified Human Plasma Purified

IgE, kappa and lambda

IgG1, kappa IgG2, kappa IgG4, kappa IgM >95% Pure

IgM, Fc5U

IgA1, kappa IgA1, lambda IgA2, kappa

IgA IgG

IgG (Fab) IgG (Fc)

IgG3

IgM (mu Chain) IgM >95% Pure

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产品列表

小鼠免疫球蛋白 使用小鼠抗体的夹心或竞争性 ELISAs 或层析试验应该使用小鼠 Igs。患者样品中可潜在干扰试验信号的任何人抗鼠抗体 (HAMA) 均可与小鼠Ig结合, 避免将干扰试验结果的非特异性结合。

特异性

产品编号 A03900M A01696M A03090M A31171H A03169M

来源

格式

IgE, Mouse

Mouse Serum Aff.Pur. Mouse Myeloma Purified Mouse Myeloma Aff.Pur. Mouse Myeloma Purified Mouse Myeloma Purified

IgG2a, kappa, Mouse IgA, kappa, Mouse IgG1, kappa, Mouse IgM, kappa, Mouse

IgG, Mouse Protein A (9-13mg/ml) Dialyzed Azide Free

A66186M-NA Mouse Serum Purified

IgG, Mouse-Caprylic Acid Cut IgG, Mouse-Protein A (9-13 mg/mL) IgG, Mouse-Protein A (22-28 mg/mL)

A66187M A66186M A66181M A66189M A66185M

Mouse Serum Purified Mouse Serum Purified Mouse Serum Purified Mouse Serum Purified Mouse Serum Purified Mouse Serum Purified Lyopholized

IgG, Mouse Protein A (45-55mg/mL) No Azide

IgG, Mouse-Protein A (50-55 mg/mL) IgG, Mouse-Protein A (50-55mg/ml)

A66185M-LY

兔免疫球蛋白 使用兔抗体的夹心或竞争性 ELISAs 或层析试验应该使用兔 Igs。患者样品中可潜在干扰试验信号的任何人抗兔抗体均可与 兔 Ig 结合,避免将干扰试验结果的非特异性结合。

特异性

产品编号 A66100H A66105R

来源

格式

IgG, Rabbit-Differential ppt IgG, Rabbit-Differential ppt

Rabbit Serum Purified Rabbit Serum Purified

大鼠免疫球蛋白 使用大鼠抗体的夹心或竞争性 ELISAs 或层析试验应该使用大鼠 IgG。患者样品中可潜在干扰试验信号的任何人抗鼠抗体均可与 大鼠IgG结合, 避免将干扰试验结果的非特异性结合。

特异性

产品编号 A64391R

来源

格式

IgG, Rat

Rat Serum

Purified

绵羊免疫球蛋白 使用绵羊抗体的夹心或竞争性 ELISAs 或层析试验应该使用绵羊 Igs。患者样品中可潜在干扰试验信号的任何人抗羊抗体均可与 绵羊 Ig 结合, 避免将干扰试验结果的非特异性结合。

特异性

产品编号 A66400S

来源

格式

IgG Sheep, >=70mg/mL

Sheep Serum Purified

免疫阻断剂实用指南

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固相阻断剂 固相阻断剂用于使固相上未被结合的结合位点饱和, 从而防止非特异性结合。通常封闭缓冲液既能阻断固相上的疏水位点又能 阻断固相上的亲水位点。另外, 蛋白质在固相表面反应时它们还可以作为稳定剂和防止变性作用。

特异性

产品编号 来源

格式 n/a

Blocking Buffer for ELISA

J82100B J82300B J16430D J16200D A64801B A01245B A51300B

n/a n/a n/a n/a

Blocking Buffer for Lateral Flow Assays, PBS based

Liquid Liquid Liquid

Coating Stabilizer & Blocking Buffer Conjugate Stabilizer Diluent, HRP

BSA, Standard Powder Gamma Globulin, Bovine Gamma Globulin, Bovine Bovine Serum Albumin (BSA) Bovine Serum Albumin (BSA)

Bovine Bovine

Purified Purified Purified Aff.Pur. Aff.Pur.

Bovine Serum

C5BP01-188 Chicken C5BP01-296 Chicken

IgG 吸附剂 IgG 吸附剂用于在 ELISA 或其它免疫分析检测特异性 IgM 抗体之前从血清和血浆中除去人 IgG 和 Ig /类风湿因子 (RF) 复合 物。已证明除去 IgG 干扰能够显著增加 IgM 检测的灵敏度。

特异性

产品编号 来源

格式

IgM Assay Diluent

8120

Goat

Purified

IgG (Fc) IgG (Fc) IgG (Fc)

L15406G Goat

Monospecific

G5G16-048

Goat

Aff. Pur. Purified

L62540G Goat

TRU Block™ - HAMA & RF 阻断剂 在双鼠单克隆夹心试验中, 应该使用针对人抗鼠抗体 (HAMA))和类风湿因子 (RF) 的主动阻断剂来避免非特异性干扰导致错 误的试验结果。TRU Block 是一种专利的主动阻断剂, 能够显著减少试验干扰和改善试验结果。其使用浓度低于被动阻断剂 比如小鼠 IgG。

特异性

产品编号 来源

格式

TRU Block™, Ready Heterophilic Antibody Interference, Active Blocker TRU Block™ 2, Heterophilic Antibody Interference, Active Blocker TRU Block™ 3, Heterophilic Antibody Interference, Active Blocker TRU Block™, Heterophilic Antibody Interference, Active Blocker TRU Block™ Ultra, Heterophilic Antibody Interference, Active Blocker

8001

Confidential

Purified Purified Purified Purified Purified

A66802H A66803H A66800H

Mouse & Confidential Mouse & Confidential Mouse & Confidential

8000

Confidential

HAMA & RF 试剂 HAMA (人抗鼠抗体) 或类风湿因子阳性患者样品, 可用于检测一种阻断剂在所有类型试验中的有效性。

特异性

产品编号 来源

格式

Human Anti Mouse Antibody (HAMA) Plasma Rheumatoid Factor (RF) Control Serum Rheumatoid Factor (RF) Control Serum

A01431H A01270H A12916H

Human Plasma Neat Human Plasma Neat Human Plasma Neat

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产品列表

二级抗体用于间接检测, 通过增强信号来增加灵敏度, 标记和检测的灵活性更大。二级抗体应该与一级抗体的宿主种类不一致, 但 是应该对一级抗体的种类具有特异性。例如, 如果一级抗体来源于小兔, 二级抗体应该是抗兔的, 但是应该在小兔以外的宿主种类 产生(例如, 山羊抗兔二级抗体)。 二级抗体

鼠单抗

绵羊多抗

特异性

产品编号 格式 Isotype Z01253M Purified IgG2b

特异性

产品编号 格式

IgA (Fc), Human IgA (Fc), Human

IgA, Human

W90010F

FITC

Z01253P

HRP

IgG2b

IgG (H&L), Human

R5G10-048

Aff.Pur.

IgA (Secretory Component), Human

Z42750M Purified IgG1

兔多抗

IgA, Human

Z01250M Purified IgG1 Z86104M Purified IgG2a MAGG16-264 Purified IgG2b,k Z01247M Purified IgG Z54101M Purified IgG1

特异性

产品编号 格式

IgE (Fc), Human IgG (Fc), Goat IgG (Fc), Human IgG (Fc), Human IgG (Fc), Human IgG (Fc), Human IgG (Fc), Human IgG (Fc), Rabbit

IgA, Human

W90010F

Biotin

IgG (Fc), Canine IgG (Fc), Human

W99114C Aff.Pur. W99165C Aff.Pur.

IgG (Fc) (min x w/Hu), Goat

W99122P R5G10-048 W01256R

HRP

Z86101P

HRP

IgG

IgG (H&L), Human IgG (H&L), Mouse IgG (H&L), Sheep IgG (H&L), Sheep

Aff.Pur. Aff.Pur.

Z86213M Purified IgG Z86238M Purified IgG1

R5SG10-048 Aff.Pur.

MARG16-125 Purified IgG2b,k IgG (Heavy Chains), Human Z20142M Purified IgG1,k IgG, Human Z01236M Purified IgG1,k IgG, Sheep P86502M Purified IgG1 IgG1 (Fc), Human Z86102M Purified IgG1 IgG2 (Fc) gamma-2, Human Z86002M Purified IgG2 IgG3 (hinge-region), Human Z86130M Purified IgG1 IgG4 (Fc), Human Z20154M Purified IgG1,k IgG4 (Fc), Human Z86140M Purified IgG1 IgM (Fab-region), Human Z86215M Purified IgG2b IgM (Fc), Human Z86113M Purified IgG1 IgM (Fc-region), Human Z01234M Purified IgG1 IgM (Heavy Chains), Human Z86110M Purified IgG1 IgM (Heavy Chains), Human Z86114M Purified IgG1 IgM, Human Z01235M Purified IgG1,k IgM, Human Z45190M Purified IgG1 IgM, Sheep P86501M Purified IgG1

W99245P

HRP

IgM, Mouse

W99020C Aff.Pur.

大鼠单抗

特异性

产品编号 格式 Isotype P87106M Aff.Pur. IgG1

IgG2a, Mouse

免疫阻断剂实用指南

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山羊抗人多抗

山羊抗小鼠多抗

特异性

产品编号 Format W01262FL FITC

特异性

产品编号 格式 W03700G HRP G5MG16-048 Aff.Pur. W41202G HRP G5MG20-0482 Aff.Pur. W99062G Aff.Pur. G5MG10-048 Aff.Pur. G5MG10-0482 Purified G5MG10-0484 Aff.Pur. W41250G TRITC W41502G FITC G5MG10-766 Aff.Pur W03910G HRP 产品编号 格式 G5G16-766 Aff.Pur. W41613G Aff.Pur. W41600G Aff.Pur. G5RG10-048 Aff.Pur. G5RG10-0482 HRP G5RG14-0483 FITC S5RG10-0481 Alk.Phos. W41604G Aff.Pur.

IgG (H+L)

IgE (epsilon chain)

IgA

L66605G Monospecific L62507G Purified G5G41-048 Aff.Pur. G5G41-048 Aff.Pur. K10262G Aff.Pur. W99036P HRP W01252G Aff.Pur. G5G16-0482 HRP W66040G Aff.Pur. W99008A Alk.Phos.

IgG (Fc) IgG (Fc)

IgE (epsilon)

IgE (Fc) IgE (Fc)

IgG (gamma)

IgG (H&L) (min x w/Hu Bov Hrs)

IgE (NHS Adsorbed)

IgG (H&L) IgG (H&L) IgG (H&L) IgG (H&L) IgG (H&L)

IgG (Fc) (min x w/Hu Bov Hrs Ms) IgG (Fc) (min x w/Hu Bov Hrs Ms Rab)

IgG (Fc) IgG (Fc) IgG (Fc) IgG (Fc)

IgG (H&L, Goat)

IgG1

W99008P HRP

IgG (H&L) (min x w/Bov Hrs Ms)

W01239F

FITC

山羊抗兔多抗

IgG (H&L)

W01260AF Alexa Fluor 488 W41808G Aff.Pur.

特异性

IgG (Fc) IgG (Fc)

IgG (H&L) IgG (H&L) IgM (Fcu) IgM (Fcu)

W99003P HRP

IgG (H&L) (min x w/Hu Ms Bov)

L66607G Monospecific

IgG (H&L) IgG (H&L) IgG (H&L) IgG (H&L) IgG (H&L) IgG (H&L)

W99154A Alk.Phos

IgM (Fcu) W99154G Aff.Pur. IgM (mu) (min x w/Bov Gt Ms Rab) W01251G Aff.Pur. IgM (mu) (min w/IgA and IgG) W01259G Aff.Pur. IgM (mu) G5G54-048 Aff.Pur. IgM (mu) G5G54-0482 HRP IgM (mu) G5G56-048 Aff.Pur. IgM (mu)

W99035P

HRP

山羊抗牛多抗

L04354G Monospecific

IgM (mu) IgM (mu) IgM (mu) IgM (mu)

L62650G Purified W01258G Aff.Pur. W66210G Aff.Pur.

特异性

产品编号 格式 W01254G Aff.Pur.

IgG (H&L) IgG (H&L) IgG (H&L)

W99101B

Biotin

W66310G Aff.Pur. Kappa Light Chain (Free & Bound) L15805G Purified Kappa Light Chain (Free & Bound) L62805G Monospecific Lambda Light Chain (Free&Bound) K04365G Purified Lambda Light Chain (Free&Bound) L15905G Purified Lambda Light Chain (Free&Bound) L62905G Monospecific

W99101G Aff.Pur.

山羊抗狗多抗

特异性

产品编号 格式 W99114C Aff.Pur.

IgG (Fc)

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