推荐的阻断剂 用于消除免疫夹心法干扰的阻断剂
免疫检测阻断剂: 减少抗体干扰引发的假性结果 使用经过验证的阻断剂来保障您的免疫检测
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干扰清除,检测更准
免疫阻断剂是检测中减少由非特异性结合和抗 体干扰(例如HAMA 和类风湿因子RF)引起的 假性结果的重要工具。 在ELISA和免疫层析检测中,阻断剂通过提高信噪比来提高检测 的准确性。在常见的检测类型中(如夹心抗原检测、抗体捕获 和竞争性ELISA),选择高亲和力抗体和合适的阻断剂对于实现 高特异性和灵敏度至关重要。 自COVID-19疫情以来,许多检测开商反馈曾感染过新冠病毒 的患者体内的免疫干扰有所增加。据分析,导致这一现象的 因素之一可能是在SARS-CoV-2感染后,循环自身抗体(尤其 是IgM-RF)水平上升。研究表明,像其他呼吸道病毒感染一 样,COVID-19可能会引发长期的免疫失调,导致具有广泛结 合能力的多反应性抗体出现 1 。 这些抗体,尤其是 IgM-RF,可以结合到检测抗体的Fc区域 ,特 别是那些来自动物源的抗体,形成免疫复合物,模拟产生真实 信号。结果导致检测结果假阳性、背景信号升高以及检测特异 性降低,影响了临床信心和诊断可靠性。 随着这一挑战的增长,许多检测开发商正在重新评估他们的阻 断策略,并探索新的解决方案,以减轻在日益复杂的后疫情样 本中的干扰。
检测抗体
检测标记
IgM RF
捕获抗体
免疫复合物模仿真实检测信号
1 Mohan, A., et al. (2023). Navigating the Post-COVID-19 Immunological Era: Understanding Long COVID-19 and Immune Response. Life 13(11), 2121. https://doi.org/10.3390/life13112121
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选择合适的阻断剂 为每个开发阶段量身定制的阻断解决方案
准确的免疫检测不仅依赖于高质量的抗体,还依赖于有效的阻断策略,最大程度 降低背景信号和干扰,尤其是来自HAMA、RF和其他异嗜性抗体的干扰。 无论您是在开发ELISA、免疫层析检测(LFA)还是化学发光免检测 (CLIA),Meridian迈迪安生物的阻断剂都是您的第一道防线。 我们提供的可信赖阻断剂解决方案包括: • 小鼠血清 • 小鼠 IgG • TRU Block™ 系列 (TRU Block™, TRU Block™ 2, TRU Block™ 3) • K-BLOCK™
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探索Meridian全系列干扰阻断试剂:
阻断剂
阻断剂类型 被动阻断剂
干扰类型
适用检测
小鼠血清
HAMA, 非特异性结合蛋白
ELISA, LFA
Mouse IgG TRU Block™ TRU Block™ 2 TRU Block™ 3
被动阻断剂
HAMA
ELISA, CLIA ELISA, CLIA
通用阻断剂 (主动 + 被动)
HAAA, RF, HA
ELISA, CLIA, LFA
ELISA, CLIA
K-BLOCK™
主动阻断剂
HAAA, RF, HA
ELISA, CLIA, LFA
不确定如何选择合适的阻断剂? 欢迎浏览我们的 阻断剂网页 ,或联系我们的技术团队获取专属指导!
中和HAMA干扰,获得更清晰的检测结果 小鼠IgG 是一种高度纯化的免疫球蛋白,专用于阻断人抗鼠抗体(HAMA)所导致的干扰。HAMA是免疫检测中使用鼠单克隆抗 体时常见的干扰源。该阻断剂通过与样本中的HAMA结合,有效防止其与检测系统中的抗体发生非特异性结合,从而提高检测 的特异性与准确性。 小鼠血清 , 则具备更广谱的阻断能力。其成分中含有天然来源的鼠蛋白混合物(包括多种免疫球蛋白),可针对多种潜在干扰因 子发挥作用,特别适用于存在多重干扰风险的复杂样本。 小鼠IgG & 小鼠血清
适用场景建议
小鼠IgG
小鼠血清
用于高灵敏度检测中的 HAMA特异性干扰阻断
适用于检测开发早期阶段或存在多重干扰 风险时的广谱阻断需求
优势 • 降低假阳性与假阴性结果 • 提升检测的重复性与一致性 • 兼容ELISA、CLIA和LFA等多种检测平台
产品订购信息
小鼠 IgG
产品代号 A66181M A66185M
22—28 mg/mL 50—55 mg/mL
A66185M-NA
50—55 mg/mL, Azide Free
A66186M
9—13 mg/mL
A66186M-NA
9—13 mg/mL, Azide Free
A66187M A66189M
10—20 mg/mL
45—55 mg/mL, Proclin 30—40 mg/mL, Azide Free
A66190M-NA
88131
小鼠血清
阻断剂使用场景指南 存在干扰风险的检测类型
夹心法检测
血清学检测 (IgM, IgG, IgA)
竞争法检测
检测标记
检测标记
二级抗体
检测标记
检测抗体
抑制抗原
检测抗体
患者 IgG抗体 患者 IgM抗体
患者样本
抗原
捕获抗体
捕获抗体
抗原
直接法
间接法
IgG 检测
IgM 检测
直接法
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分层阻断,应对各种检测挑战 TRU Block™ 是Meridian迈迪安生物旗下旗舰级免疫阻断剂系列,专为解决多种检测难题而设计。 所有TRU Block™ 配方均由不同组合比例的小鼠IgG和专有的主动阻断剂组成。每个版本均针对不同干扰程度和检测灵敏度进行了 优化,助力实现精准可靠的免疫检测结果。 TRU Block ™ 系列
深入了解 TRU BLOCK™ 各配方的区别
TRU Block ™
TRU Block ™ 2
TRU Block ™ 3
• 主动阻断剂含量较高,小鼠IgG含 量较低 • 已在ELISA和CLIA平台上验证
• 小鼠IgG含量较高,主动阻断剂 含量较低 • 已在ELISA和CLIA平台上验证
• 主动阻断剂与小鼠IgG的平衡配比 • 已在ELISA、CLIA和LFA平台上验证
专有配方
小鼠 IgG
为什么选择TRU BLOCK™ 系列? • 多平台验证的卓越性能 • 对检测动力学影响极小 • 提供散装及定制规格 三款配方均为通用型阻断剂,能够有效应对包括HA(异嗜性抗体)、HAMA(人抗鼠抗体)和RF(类风湿因子)在内的多种干 扰因素。 产品订购信息 HAMA & RF 阻断剂 产品编号 TRU Block ™ A66800H TRU Block ™ 2 A66802H TRU Block ™ 3 A66803H
The TRU Block ™ 系列在阻断HAMA和RF 方面表现优于单纯小鼠IgG及其他市售的HAMA阻断剂。
( A ) HAMA 干扰抑制
( B ) RF 干扰抑制
小鼠 IgG
TRU Block ™
TRU Block ™ 2
TRU Block ™ 3
竞品 (主动阻断剂)
阻断剂浓度 ( μ g/mL)
阻断剂浓度 ( μ g/mL)
图中显示了在不同浓度下,小鼠IgG, 各款TRU Block™系列产品, 以及 主流竞品主动阻断剂 对 (A) HAMA干扰 和 (B) RF干扰 的阻断效果(以百分比 表示)。阻断率越高,说明阻断性能越好。结果表明,在 (A) HAMA干扰抑制中,TRU Block™ 系列在低浓度下表现优于主流竞品;在 (B) RF干 扰抑制中,TRU Block™ 系列在所有浓度下均优于竞品表现。
K-BLOCK ™
高效广谱阻断,且不含动物源成分 K-BLOCK™ 是一款专有配方的重组免疫球蛋白与蛋白质混合物,作为广谱型主动阻断剂,能够有效阻断多种常见干扰物质, 包括但不限于:
• 异嗜性抗体 • 类风湿因子 • •类抗动物抗体(如 HAMA、HAGA、HARA 等)
产品订购信息 K-BLOCK ™
BN1200
核心特点 • 适用于多种物种与样本类型 • 非常适合胶体金(免疫层析)和即时检测(POCT)平台 • 重组来源、无动物成分阻断剂
应用
层析平台 ELISA和CLIA平台 高通量筛查平台
K-BLOCK™ 在阻断HAMA和RF方面的效果优于小鼠IgG及其他市售HAMA阻断剂。
( A ) HAMA 干扰抑制
( B ) RF 干扰抑制
小鼠 IgG
K-BLOCK ™
竞品 (主动阻断剂)
阻断剂浓度 ( μ g/mL)
阻断剂浓度 ( μ g/mL)
图示为在不同浓度下,小鼠IgG, K-BLOCK™, 和 主流竞品主动阻断剂 对 (A) HAMA干扰 和 (B) RF干扰 的阻断百分比。阻断率(%)越高,表示阻 断性能越强。结果显示,K-BLOCK™ 在 (A) HAMA干扰中于低浓度下即表现出优于竞品的阻断效果;在 (B) RF干扰中,则在所有浓度下均优于 竞品表现。
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使用时需特别考虑的事项:
IgM 血清学检测 IgM血清学检测常面临两类主要干扰: 1. 患者血清中高浓度IgG抗体的干扰 :IgG占血清总抗体约 75%,浓度远高于IgM,易在固相抗原上与IgM竞争结合位点,从而 抑制IgM的有效结合,导致假阴性或信号减弱。 2. 类风湿因子(RF)引起的干扰 :RF能与免疫球蛋白的Fc区结合,形成免疫复合物,从而导致非特异性信号增强,造成假阳 性结果。 为应对上述干扰,IgM血清学检测通常需要两类阻断剂的组合使用:
- HAMA/RF 阻断剂 :用于降低类风湿因子及人抗鼠抗体等非特异性免疫反应干扰; - IgG 吸附剂 :用于去除或中和高浓度、可能交叉反应的IgG抗体,确保IgM检测的特异性。
IgM 检测推荐阻断剂
IgG吸附
IgM检测稀释液
山羊抗人IgG Fc段抗体
ELISA IgM 检测稀释液 I
L15406G
8120
IgG吸附剂是一种纯化的山羊抗人IgG Fc 片段抗体(GAH IgG Fc),专门用于在ELISA或其他免疫检测中检测特异性IgM抗体 前,去除血清中的人IgG及 IgG/类风湿因子(RF)复合物。去 除IgG干扰已被证明能显著提高免疫检测中IgM检测的灵敏度。 Meridian迈迪安生物提供的IgG吸附剂通过免疫电泳法进行 特异性验证,确保其专一识别IgG,且不与IgM或IgA发生交 叉反应。
IgM检测稀释液适用于定性和定量检测IgM抗体的免疫检测。 该稀释液配方旨在减少患者样本中IgG抗体、RF、异嗜性抗体 及其他非特异性蛋白对检测结果的干扰。 稀释液中的阻断蛋白含量充足,能结合检测固相上的所有空 位,有效防止干扰因子的非特异性结合。当作为试剂盒组成 部分使用时,IgM检测稀释液可显著提升IgM检测的灵敏度。
推荐操作步骤
在加入患者样本之前先进行稀释。建议使用PBS按1:10稀释。 以1:10的比例加入患者样本中,混合后孵育5至30分钟。
取一只独立的试管,将患者血清样本用IgM检测稀释液按至 少1:21的比例稀释(充分混匀)。该稀释液应与其他检测组 分保持一致的标准化配比。
提升检测性能小贴士 阻断剂使用指南 ELISA
CLIA 在检测体系准备阶段加入 反应混合液中
免疫层析检测 可加入标记垫、样本缓冲液或预处理缓 冲液中,亦可直接涂布于膜上,作为测 试线前的阻断条带使用。
可加入样本或标记物稀释液中,但理想 情况下,应先与患者样本接触,再与检 测用捕获抗体孵育。
阻断剂
推荐浓度
小鼠血清 小鼠IgG
样本或标记物稀释液的体积比例为5%至20%(v/v)
浓度为0.1–2 mg/mL,或为检测中所用标记单克隆抗体浓度的10倍。
稀释样本:0.5–20mg/mL,未稀释样本:5–200 mg/mL
TRU Block™ 系列
0.2-200 μ g/mL
K-BLOCK™ IgG 吸附剂
在加入患者样本之前先稀释(用PBS按1:10稀释),然后按1:10的比例加入患者样本中。 使用前将稀释液预先恢复至室温,并以不低于1:21的比例加入患者样本中。
IgM 检测稀释液
常见问题
被动阻断剂与主动阻断剂有何区别? 被动阻断剂 (如小鼠IgG、山羊IgG)通过与样本中的非特异性位点或干扰性抗体结合,起到降低背景噪音的作用。 主动阻断剂 (如TRU Block™)则采用靶向独家配方,可专门中和特定干扰抗体,如HAMA(人抗鼠抗体)或RF(类风湿因 子),在复杂样本中提供更高水平的干扰保护。 什么时候应使用 TRU Block™ 而不是小鼠IgG? 小鼠IgG属于被动阻断剂,可通过竞争性结合减少HAMA干扰,但通常需较高浓度,可能影响检测体系稳定性。 TRU Block™ 是主动阻断剂,可在较低浓度下更有效中和包括HAMA和RF在内的多种干扰抗体。 一般样本中建议使用小鼠IgG进行基础阻断;在高风险样本(如COVID-19 后或自身免疫人群)中,建议使用TRU Block™ 以获得更 强、更具靶向性的阻断效果。 哪些类型的检测最适合使用阻断剂? 阻断剂广泛应用于 ELISA、免疫层析检测(LFA) 和 化学发光免疫检测(CLIA) 等平台,尤其是在夹心法和抗体捕获类检测 中,因其更容易受到假阳性干扰。 我该如何确定最适合我检测方法的阻断剂类型? 这取决于:
检测类型 (例如:夹心法与竞争法)
样品类型 (例如:血清、血浆、全血)
常见干扰因素 (例如 RF、HAMA)
物种类型 检测抗体来源
请联系Meridian技术团队, 获取量身定制的阻断剂推荐方案。 什么是最常见的免疫检测干扰? 人抗鼠抗体 (Human anti-mouse antibodies, HAMA) 是最常见的抗体干扰类型,它会在基于两位点小鼠单克隆抗体的检测 中引起假阳性或假阴性干扰。 HAMA 是唯一一种异嗜性抗体干扰吗? 不是。HAMA只是异嗜性抗体(HA)干扰中的一种。其他常见的异嗜性抗体还包括针对 山羊 (HAGA)、 绵羊 (HASA)、 兔子 (HARA)等动物的抗体。当免疫检测中使用这些动物来源的抗体时,也可能导致假结果。 除异嗜性抗体外,还有一类称为 类风湿因子 (RF)的干扰物,它是一种自身抗体,可与患者自身免疫球蛋白(Ig)发生反应,并能 交叉反应动物Ig,类似于HA/HAMA的干扰。 什么是类风湿因子(rheumatoid factor ,RF)? 类风湿因子是一种针对IgG Fc片段的自身抗体。其中以IgM型RF最为常见且最具干扰风险,因为其五聚体结构使其极易交联形成免 疫复合物。 IgM-RF 在类风湿关节炎患者中约有一半人群检测阳性,但约 5% 的非类风湿患者也可能有较高水平,且老年人中更为常 见。 类风湿因子如何干扰免疫检测? RF类似于异嗜性抗体,能够通过交联检测抗体导致假阳性,即使样本中不存在目标分析物。其主要机制是与检测抗体的Fc片段结 合。RF可与多种物种的IgG反应,包括人源和兔源IgG。 如何保护免疫检测免受新冠疫情后免疫变化的影响? COVID-19疫情导致循环中自身抗体水平上升,尤其是多反应型 IgM类风湿因子(RF),这可能影响免疫检测的准确性。为确保检测 结果可靠,许多研发团队现已开始使用疫情后临床样本进行验证,并加入高效阻断剂以降低假阳性风险。
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