使用时需特别考虑的事项:
IgM 血清学检测 IgM血清学检测常面临两类主要干扰: 1. 患者血清中高浓度IgG抗体的干扰 :IgG占血清总抗体约 75%,浓度远高于IgM,易在固相抗原上与IgM竞争结合位点,从而 抑制IgM的有效结合,导致假阴性或信号减弱。 2. 类风湿因子(RF)引起的干扰 :RF能与免疫球蛋白的Fc区结合,形成免疫复合物,从而导致非特异性信号增强,造成假阳 性结果。 为应对上述干扰,IgM血清学检测通常需要两类阻断剂的组合使用:
- HAMA/RF 阻断剂 :用于降低类风湿因子及人抗鼠抗体等非特异性免疫反应干扰; - IgG 吸附剂 :用于去除或中和高浓度、可能交叉反应的IgG抗体,确保IgM检测的特异性。
IgM 检测推荐阻断剂
IgG吸附
IgM检测稀释液
山羊抗人IgG Fc段抗体
ELISA IgM 检测稀释液 I
L15406G
8120
IgG吸附剂是一种纯化的山羊抗人IgG Fc 片段抗体(GAH IgG Fc),专门用于在ELISA或其他免疫检测中检测特异性IgM抗体 前,去除血清中的人IgG及 IgG/类风湿因子(RF)复合物。去 除IgG干扰已被证明能显著提高免疫检测中IgM检测的灵敏度。 Meridian迈迪安生物提供的IgG吸附剂通过免疫电泳法进行 特异性验证,确保其专一识别IgG,且不与IgM或IgA发生交 叉反应。
IgM检测稀释液适用于定性和定量检测IgM抗体的免疫检测。 该稀释液配方旨在减少患者样本中IgG抗体、RF、异嗜性抗体 及其他非特异性蛋白对检测结果的干扰。 稀释液中的阻断蛋白含量充足,能结合检测固相上的所有空 位,有效防止干扰因子的非特异性结合。当作为试剂盒组成 部分使用时,IgM检测稀释液可显著提升IgM检测的灵敏度。
推荐操作步骤
在加入患者样本之前先进行稀释。建议使用PBS按1:10稀释。 以1:10的比例加入患者样本中,混合后孵育5至30分钟。
取一只独立的试管,将患者血清样本用IgM检测稀释液按至 少1:21的比例稀释(充分混匀)。该稀释液应与其他检测组 分保持一致的标准化配比。
提升检测性能小贴士 阻断剂使用指南 ELISA
CLIA 在检测体系准备阶段加入 反应混合液中
免疫层析检测 可加入标记垫、样本缓冲液或预处理缓 冲液中,亦可直接涂布于膜上,作为测 试线前的阻断条带使用。
可加入样本或标记物稀释液中,但理想 情况下,应先与患者样本接触,再与检 测用捕获抗体孵育。
阻断剂
推荐浓度
小鼠血清 小鼠IgG
样本或标记物稀释液的体积比例为5%至20%(v/v)
浓度为0.1–2 mg/mL,或为检测中所用标记单克隆抗体浓度的10倍。
稀释样本:0.5–20mg/mL,未稀释样本:5–200 mg/mL
TRU Block™ 系列
0.2-200 μ g/mL
K-BLOCK™ IgG 吸附剂
在加入患者样本之前先稀释(用PBS按1:10稀释),然后按1:10的比例加入患者样本中。 使用前将稀释液预先恢复至室温,并以不低于1:21的比例加入患者样本中。
IgM 检测稀释液
Powered by FlippingBook