干扰 HA (e.g. HAMA) 小鼠 IgG
小鼠 IgG
免疫检测中为什么需要使用免疫阻断剂,例如小鼠IgG? 在ELISA和免疫层析检测中使用阻断剂是为了减少病人样本中蛋白质的干扰,这种干扰可 能会产生错误结果和错误诊断。特别是在双小鼠单克隆检测中,需要使用阻断剂来消除 特定类型的HA干扰,即人类抗小鼠抗体(HAMA)和类风湿因子(RF)。被动阻断试剂 (如小鼠IgG)通过提供替代结合位点,阻止干扰抗体与捕获或检测抗体结合。小鼠IgG 必须过量添加,其效果取决于干扰抗体对动物IgG的亲和力。
IgM RF
检测抗体 (小鼠源)
捕获抗体 (小鼠源) 抗原
封闭剂
Figure 2. 小鼠 IgG 等阻断抗体可以中和血清样本中的干扰抗 体,从而使捕获抗体和检测抗体与目标检测物准确结合。
Mouse-FREE IgG 性能数据
A) HAMA 干扰
100
100
100
相 对 阻 断 效 率
80
80
69
66
阻 断 效 率 (%)
60
60
42
40
40
20
20
0
0
0.0001
0.001
0.01
0.1
1
10
天然小鼠IgG
竞品阻断剂 #1
竞品阻断剂 #2
迈迪安 Mouse-Free IgG
阻断剂浓度 ( µ g/ml)
B) RF 干扰
100
100
100
相 对 阻 断 效 率
80
80
60
60
阻 断 效 率 (%)
40
40
20
20
14
14
11
0
0
0.01
0.1
1
10
100
天然小鼠IgG
竞品阻断剂 #1
竞品阻断剂 #2
迈迪安 Mouse-Free IgG
阻断剂浓度 ( µ g/ml)
迈迪安 Mouse-Free IgG | 天然小鼠 IgG | 竞品阻断剂 #1 | 竞品阻断剂 #2
Figure 3. 采用双鼠单克隆夹心检测法比较迈迪安的Mouse-FREE IgG(100%不含动物成分的重组小鼠IgG,产品编号# BN1300)与纯化的天然小鼠IgG和两种竞品HAMA阻断剂的 性能。(A)人类HAMA阳性或(B)RF阳性血清在室温下与各阻断剂预孵育20分钟。HAMA检测的阻断剂浓度为0.0003-1.25 μg/mL,RF检测的阻断剂浓度为0.0195-80 μg/mL。 通过比较对HAMA或RF信号的相对抑制来确定每种阻断剂的有效性--EC50值越低,说明阻断干扰效果越强。结果表明,Mouse-Free IgG在阻断HAMA和RF干扰方面的效果明显优 于天然小鼠IgG和两种竞品阻断剂。
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