Lyo-Ready Direct Blood 可冻干血液直扩 用于全血、血清或血浆样本的超灵敏 qPCR/RT- qPCR直接扩增
Lyo-Ready TM Direct Blood 可冻干血液直扩 用于全血、血清或血浆样本的超灵敏 qPCR/RT- qPCR 直接扩增
Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩qPCR/RT-qPCR预混液是4x浓度、不含甘油、含有优化的冻干赋形剂的 检测试剂 ，适用于从全血、血清或血浆粗样中进行超灵敏的DNA 或 RNA直接扩增。 血液是临床诊断中最常见的样本之一，有助于评估重要器官(肾脏、肝脏、甲状腺和心脏)的功能，并有助于诊断疾病，如 细菌和病毒感染、癌症、心血管疾病和代谢紊乱(如糖尿病)。而全血、血清和血浆中含有免疫球蛋白G、血红蛋白、乳铁蛋 白和白细胞DNA等，以及用于稳定样本的抗凝剂(如EDTA、柠檬酸盐或肝素)，这些会对qPCR/RT-qPCR反应产生抑制性影 响。传统的方法是在检测前进行DNA/RNA提取步骤清除这些PCR抑制物，但是这些方法存在一些弊端，并不是100% 有 效，会导致样品丢失和污染，同时也不能完全去除样品中存在的所有抑制物。 迈迪安推出的 Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩qPCR /RT-qPCR预混液具有高度抑制物耐受性的特点，可直接从全血、血清或 血浆中进行DNA/RNA定量检测。该即用型试剂可对富含抑制物的血液样本实现高效灵敏地扩增，除了添加优化的引物探针 外无需其他优化步骤。此外，它既可用于液体体系也可以通过冻干制备成常温稳定的干燥型检测。
产品亮点
• 超灵敏直接扩增，可检测低于10拷贝的 DNA 或RNA • 对20%的全血、血清、血浆中存在的抑制物和 20%的抗凝剂有强耐受性 • 适用于单重或多重检测 • 可用于液体体系，或冻干体系， 冻干后可常 温储存18+个月 • 可兼容不同冻干条件 • 经验证可用于检测血液病原体和液体活检
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL 1,000 个反应 50 mL 10,000 个反应 5 mL 1,000 个反应 50 mL 10,000个反应
Lyo-Ready ™ Direct DNA qPCR Blood
MDX122
Lyo-Ready™ Direct RNA/DNA qPCR Blood
MDX123
www.MeridianBioscience.com/lifescience
从复杂且富含抑制物的血液样本中超灵敏地检测DNA或RNA
20%血清样本中灵敏地DNA扩增
比较冻干干燥后的Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩 qPCR试剂(红色)与KAPA Probe Force (绿色)的性能。在多重qPCR检测中分别使用这两种试剂对20% 血清样本中连续10倍稀释的质粒DNA(分别含有10000、1000、100和10个 拷贝)进行直接扩增。结果显示，在含有PCR抑制物存在的条件下，对低拷贝 的DNA 模板使用Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩qPCR试剂比KAPA Probe Force 具有更高的灵敏度和重现性。
10,000 个拷贝 1,000 个拷贝
100 个拷贝 10 个拷贝
Lyo-Ready ™ Direct DNA qPCR Blood | KAPA Probe Force
5% K2-EDTA全血样本中灵敏地RNA扩增
比较冻干干燥后的Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩RT-qPCR试剂(红色)与 UltraPlex 1-Step ToughMix (灰色)的性能。在多重RT-qPCR试验中，分别使 用这两种试剂对5% K2-EDTA全血中连续10倍稀释的哺乳动物RNA (分别为 10,000、1,000、100和10拷贝)进行直接扩增。结果显示，在含有PCR抑制 物存在的条件下，对低拷贝的RNA 模板使用Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩 RT-qPCR试剂比UltraPlex 1-Step ToughMix 具有更高的灵敏度和重现性。
10,000 个拷贝 1,000 个拷贝
100 个拷贝 10 个拷贝
Lyo-Ready ™ Direct RNA/DNA qPCR Blood | UltraPlex 1-Step ToughMix
对全血样本和抗凝剂(K2-EDTA, 肝素钠, 柠檬酸钠)具有更强的耐受性能
A/ Lyo-Ready™ Direct DNA qPCR Blood (MDX122)
45 B/ Lyo-Ready™ Direct RNA/DNA qPCR Blood (MDX123)
45
40
40
35
35
30
30
25
25
5%
10%
2%
5%
10%
2%
5%
10%
2%
0%
2%
5%
10%
0%
2%
5%
10%
0%
2%
5%
10%
MDX122
KAPA Probe Force (Roche)
MDX123
UltraPlex ® (Quantabio)
TaqPath ™ (ThermoFisher)
TaqPath ™ (ThermoFisher)
抗凝剂(K2-EDTA、肝素钠和柠檬酸钠)和高浓度的全血会抑制qPCR的扩增效率。在这个实验中，使用 (A) Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩qPCR预混液 (MDX122) 、对照试剂KAPA Probe Force (Roche) 和TaqPath TM (Thermo)，和(B) 可冻干血液直扩RT-qPCR预混液 (MDX123)、对照试剂Ultraplex TM 1-Step ToughMix (QuantBio) 和 TaqPath TM 1-Step (Thermo)，分别对含有K2-EDTA(橙色)， 肝素钠(绿色)或柠檬酸钠(灰色) 的0%，2%，5%和20%的人体全血进行 免 核酸提取直接扩增。 结果显示，在含有抗凝剂和高浓度血液的样本中，可冻干血液直扩qPCR/RT-qPCR预混液的扩增效率都要高于其他对比试剂。 EDTA | 肝素钠 | 柠檬酸钠
对富含抑制物的血浆、血清和全血样本的高效多重扩增
Lyo-Ready ™ Direct DNA qPCR Blood (MDX122)
金黄色葡萄球菌
恶性疟原虫
EB病毒
Lyo-Ready ™ Direct DNA qPCR Blood | KAPA Probe Force | TaqPath ProAmp Mix
分别使用冻干后的Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩qPCR预混液(MDX122)(红色)、KAPA Probe Force (绿色) 和 TaqPath ProAmp Mix (黑色) 对10% EDTA 血 浆或10%血清样本中的金黄色葡萄球菌、恶性疟原虫和EB病毒的三种DNA靶标进行扩增。 结果显示，Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩qPCR预 混液比Kapa Probe Force 和 TaqPath ProAmp具有更高的多重扩增能力。
Lyo-Ready ™ Direct RNA/DNA qPCR Blood (MDX123)
登革热
肺炎球菌
寨卡
基孔肯雅热
Lyo-Ready ™ Direct RNA/DNA qPCR Blood | TaqPath 1-Step Multiplex Master Mix | UltraPlex 1-Step ToughMix
分别使用Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩RT-qPCR预混液 (MDX123)(红色)、TaqPath 1-Step Multiplex Master Mix (黑色)和Ultraplex TM 1-Step ToughMix (灰色)对5% K2-EDTA血液或5% K2-EDTA血浆样本的三个病毒RNA靶标(登革热、寨卡和基孔肯雅热)和一个DNA靶标(肺炎球菌)进行四 重RT-qPCR反应。 结果显示，Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩RT-qPCR预混液比对比试剂具有更高的多重扩增能力。
www.MeridianBioscience.com/lifescience
在快速循环条件下依然保持灵敏扩增
<10 分钟
标准循坏 (54 分钟)
快速循环(37 分钟)
C
A
MDX122
MDX122
B
MDX123
MDX123
在QuantStudio TM 7 Flex Real-Time PCR 仪上分别使用(A)标准循环， (B)快速循环，和(C)微流控仪器(结果未显示)三种不同的循环设置条件，使用 Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩qPCR预混液 (MDX122) 对5% EDTA血液样本中的2种哺乳动物DNA，或使用Lyo-Ready TM 可冻干血液直扩RT-qPCR预混液 (MDX123) 对5% EDTA血液样本中的2种哺乳动物RNA进行扩增。结果显示了可冻干血液直扩qPCR/RT-qPCR试剂在快速循环条件下依然能保持灵敏地扩 增。标准循环设置：3 分钟 @ 95℃, 10 秒 @ 95℃ +25 秒 @ 60℃，40个循环；快速循环设置3分钟 @ 95°C, 1 秒 @ 95℃ +1 秒 @60 ℃，40个循环。 RT-qPCR反应中，逆转录步骤为10分钟。
冻干后常温保存稳定超过18个月
A
B
冻干 | 液体
(A) 可冻干血液直扩qPCR预混液(MDX122) 和 (B) 可冻干血液直扩RT-qPCR预混液 (MDX123)冻干后进行稳定性检测。冻干后的预混液(红色)在 37℃下放置1 个月后，对含有5% EDTA 血液样本进行三重扩增，并与新鲜的液体试剂(蓝色)进行对比。结果显示，在加速试验中冻干后的试剂与新鲜液体试剂具有相同 的性能，说明了可冻干血液直扩试剂冻干后可在常温下保存超过18个月。
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