Meridian Reverse transcriptases flyer - CN

产品信息&数据详情

55C MMLV-RT (MDX117)

耐高温逆转录酶,适用于复 杂二级结构的低拷贝数RNA 靶标。

特点

• 逆转录酶耐受温度高达60°C • 适用于具有高度二级结构的RNA,如病毒基因组 • 对低拷贝数RNA靶标的高灵敏检测 • 配方可兼容冻干或风干 • 适用于开发检测的所有需求

性能数据

高温稳定性 传统的莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶(MMLV-RT)不耐高温,只能在相对较低的温度(~50°C)下维持其酶活性。但是在cDNA合成的步骤当中,较高 的逆转录温度对于降低RNA二级结构对逆转录的抑制作用和减少非特异引物结合是有益处的。

MDX117与其他逆转录酶热稳定性对比

迈迪安公司开发了一款新的热稳定MMLV-RT,具有更高的热稳定性,并且降低了RNase H的活 性。 该酶可以在60°C的温度下合成第一链cDNA。对于具有复杂二级结构的RNA靶标,更高的变 性温度可提高cDNA的产量。 实验组:迈迪安的55C MMLV-RT( 红色 )、标准MMLV-RT( 灰色 )和SuperScript III 热稳定逆转录酶(Thermo, 黑色 ) 分别在40°C-70°C热浴10分钟后,用于多重一步法RT-qPCR检测。对比组:存储在-20°C的以上三款酶直接拿出用于同 样的多重一步法RT-qPCR检测。所得的Ct值作为基础值与实验组的酶获得的Ct值对比得到Δct值。数据表明,与其他 MMLV-RT酶相比,迈迪安的55C MMLV-RT的热稳定性有所提高,并能在60°C以下的温度下高效合成cDNA。

更高效率和灵敏度 55C MMLV-RT是专为提高逆转录效率,更高 灵敏度,提高一步法RT-qPCR检测极限(LOD) 而设计的。

B2MG

Rps18L

在多重一步法RT-qPCR检测中,使用10倍连续稀释的哺乳动物总RNA,分别使用55C MMLV-RT( 红色 )和SuperScript III (Thermo, 黑色 )进行对比检测灵敏度。 结果表明,55C MMLV-RT具有更高灵敏度和荧光强度,性能更好。

兼容冻干或风干应用 55C MMLV-RT的专有配方可以用于冻干或风干的反应设置。

Flu A

MERS-CoV

RSV

干燥体系 | 液体体系

将55C MMLV-RT加入到可风干RT-qPCR预混液中,然后通过风箱干燥( 红色 )。干燥体系复溶和与新鲜配置的液体体系( 蓝色 )对比,进行三重RT-qPCR检测,检测呼吸道RNA病毒 靶标(甲型流感、中东呼吸综合征冠状病毒和RSV)。结果显示,即使在多重RT-qPCR反应等具有挑战性的条件下,55C MMLV-RT在风干后仍保持相同的性能。

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