Meridian Zika Virus Chinese

产品使用说明

蛋白质结构和分子量 寨卡病毒抗原是在昆虫细胞中表达并且应具有必要的蛋白转译后修饰(例如糖基化)所需要的正确三维结构。据分析,寨卡病毒 NS1的天然构象为六聚体,类似于其他NS1蛋白质。因此,其分子量的测试可能会因为所采用的技术不同而产生不同的结果(例 如,采用尺寸排阻色谱法刻意得到更高的分子量,原因是由于低聚合体的形成)。在检验报告书对于抗原分子量的描述是通过 SDS-PAGE还原法测定。 目前,急需开发可以用于在现场筛选大量样品的简便快速寨卡病毒感染诊断试剂。 现有的检测手段包括PCR检测病毒和抗体(IgM抗体/ IgG抗体)检测方法对于如何鉴别寨 卡病毒和其他黄病毒属的病毒感染仍然有待解决。此外直接针对病毒的检测(例如PCR) 仅能够在出现症状5天后检出病毒,而在此之后针对该病毒的检测则会逐渐转为阴性。为 了克服寨卡病毒检测的诊断试剂与其他黄病毒的交叉反应的问题,通常使用寨卡病毒包膜 重组抗原和NS1重组抗原。寨卡病毒IgG和IgM抗体一般对于某些病毒表位显示出高敏感性 和高特异性尤其是对于NS1抗原,它被认为是比包膜蛋白更为特定抗原表位。寨卡病毒的 生物安全等级是二级。

减少与登革热病毒的交叉反应 为了提高检测的特异性,必须去掉任何可能与其他抗原产生交叉反 应并导致错误结果的抗体。表位竞争阻断ELISA法中已经被用于提 高检测的特异性。它通过使用低浓度的未标记的登革热NS1抗原和 基孔肯雅NS1抗原可以阻断对于黄病毒中寨卡病毒,登革热病毒, 和基孔肯雅病毒有着高度交叉反应活性的抗体。

建议采用的登革热重组蛋白: R01656 (一型,NS1蛋白) R01659 (一型,膜蛋白) R01657 (二型,NS1蛋白) R01660 (二型,膜蛋白) R01658 (三型,NS1蛋白) R01661 (三型,膜蛋白) R01663 (四型,NS1蛋白) R01662 (四型,膜蛋白)

提高IgM检测灵敏度的方法 为了提高IgM抗体检测试剂的灵敏度,我们建议如下:

建议采用的寨卡病毒多抗: C01885G (总IgG) C01886G (亲和纯化) * C01886G 采用寨卡病毒NS1蛋白纯化以降低与其他黄 病毒如登革热病毒的交叉反应

1. IgM-捕获法: 使用抗 - 人IgM Fab片段抗体而不是使用完整的抗 - 人IgM抗体作为捕获抗体。这样允许更多的Fab片段的抗体结 合到固体材料表面从而增加总的可用的IgM抗体捕获位点数目。 2. 横向免疫层析法: 采用桥联接方法,即预先混合胶体金标记的病毒 特异性抗体(例如单克隆或多克隆登革热NS1抗体),重组抗原 (例如登革热NS1)和生物素化的抗人IgM。直接缀合的胶体金的 寨卡病毒抗原可以抑制其结合捕获IgM的能力。使用寨卡病毒多抗 可以进一步提高检测的灵敏度。

Powered by