步骤 2 末端修复
无甘油 T4 DNA 聚合酶 (HC)
产品货号 #MDX207
产品亮点 • 对 DNA进行片段化处理后用于末端 修复，可钝化双链DNA片段的 DNA末端（填充5’端突出末端或/ 和去除3’端悬空） • Sanger测序法中，去除加入到DNA链中的荧光染料标记的核苷酸 • 浓度为20 U/μL 体积 反应数 50 μ L 500 个反应 500 μ L 5,000 个反应
无甘油 T4 DNA 聚合酶 (HC) (MDX207) 是一种依赖DNA模板的DNA聚 合酶，其具有5’→3’DNA聚合酶活性，催化将核苷酸添加到DNA链的 3’ 末端，使其沿5’至3’方向延伸。它还具有3’- 5’外切酶活性，可以用于将 5’端突出末端补平或3’端突出末端削平，但缺乏5’ - 3’外切酶活性。 MDX207浓度为 20 U/μL 。 无甘油T4 DNA聚合酶可用于在任何双链DNA分子上生成钝末端，并通过 置换合成对DNA进行标记。在NGS建库过程中，它既可单独使用，也可 作为末端修复混合液的一部分，其作用是对DNA进行片段化处理后用于 末端修复，可钝化双链DNA片段的DNA末端（填充5’端突出末端或/和去 除3’端悬空），以便随后通过T4 DNA连接酶添加适配子。
冻干后酶活性保持一致
（右图）无甘油T4 DNA聚合酶（HC）（MDX207）在其反应缓冲液中冻干，并在加速稳定性研究中 测试其稳定性。将冻干的MDX207（ 红色 ）在37°C放置1个月，然后与保存在-20°C的未冻干的液体 酶（ 蓝色 ）一起进行DNA聚合活性测试比较。结果表明，经过加速稳定性测试，冻干后的MDX207 依然具有同等酶活性，在常温下可稳定保存12个月。
液体 | 冻干
无甘油 DNA Pol I Klenow 大片段 (HC) (MDX208) 是来自大肠杆菌DNA 聚合酶 I N端蛋白的水解产物，具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’-5’外切酶 活性，但没有5’-3’外切酶活性。MDX207浓度为50 U/μL 。 在NGS文库制备中主要作用是末端修复，填充5’端突出末端和去除3’端悬 空以对生成钝化的DNA。 无甘油 DNA Pol I Klenow 大片段 (HC)
产品货号 #MDX208
体积 反应数 200 μ L 10,000 个反应 1 mL 50,000 个反应
产品亮点 • 进 行末端修复以进行适配子连接 • 通过填充 5’端突出末端对dsDNA 进行标记 • 浓度为50 U/μL
反应快速且性能优异
冻干后酶活性保持一致
Meridian | NEB | Thermo | Qiagen
（上图）无甘油 DNA Pol I Klenow 大片段 (HC) 用于引物延伸检测。每个反应中无甘油 DNA Pol I Klenow 大片段 (HC) 的最终用量为5U，与 4ng模板和 Lyo-Ready Klenow 反 应缓冲液进行反应，并在相同条件下与其他供应商的产品进行比较。结果显示，与大多 数供应商相比，无甘油DNA Pol I Klenow大片段 (HC) 的反应速率更快，末端荧光更高。
液体 | 冻干
（上图）无甘油 DNA Pol I Klenow 大片段 (HC) 在37°C的液态（ 蓝色 ）或冻干（ 红色 ）条件 下的加速稳定性检测。结果显示，无甘油 DNA Pol I Klenow 大片段 (HC) 经过加速稳定性测 试后具有相同的酶活性，在常温下可稳定保存12个月。
www.meridianbioscience.com/lifescience
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