专为粗裂解样本(痰液、唾 液、粪便、尿液和血液)免提 取直接扩增优化的预混液配方
抗抑性 qPCR & RT-qPCR预混液 专为样本(痰液、唾液、粪便、尿液和血液) 免核酸提取直接扩增优化的预混液配方
临床与环境样本中常含有抑制剂,可能严重影响分子检测的灵敏度和准确性,导致结果不可靠。
为了克服这一问题,传统检测方法常常通过样本前处理和核酸提取来缓解抑制剂的干扰。然而,这些方法并非百分之百高效,在核酸提取的过 程中常伴随着靶标核酸的损失,并可能同时纯化出残留的抑制物,进而影响扩增反应,甚至引发假阴性结果。 Meridian迈迪安推出的通用抗抑性 qPCR / RT-qPCR 预混液,为开发多重qPCR检测提供了更优的解决方案。该系列试剂专为高抑制背景下的 快速检测而设计,适用于直接从粗裂解液或高抑制样本(如尿液、脑脊液、血液、痰液、唾液及粪便)中进行扩增,免除复杂的提取步骤,显 著简化工作流程。 通过增强体系稳定性与检测的耐受性,Meridian的创新配方有助于加速分子诊断流程,即使面对最具挑战性的样本类型,也能提供快速、可靠 的结果。
直接扩增操作流程
标准操作
样本
1
2
3
4
5
6
结果
裂解
捕捉
清洗
洗脱
反应设置
检测
直接扩增操作
样本
1
结果
检测
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抗抑性 qPCR 预混液
• 即用型 qPCR反应体系,采用专有缓冲系统,专为克服常见 PCR抑制物而设计 • 适用于从粗裂解液或未经处理的样本(如尿液、脑脊液、乳 液和血液)中直接扩增DNA • 免核酸提取,显著提升检测速度并缩短检测时间(TAT) • 支持冻干(Lyo-ready),只需加入引物和探针,即可开发常 温稳定的检测体系
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
500个反应
MDX013
抗抑性qPCR预混液
100 mL
10,000个反应
2 mL
500个反应
MDX073
抗抑性qPCR预混液,5x
40 mL
10,000个反应
5 mL
500个反应
可冻干抗抑性 qPCR预混液 4x
MDX184
50 mL
10,000个反应
在多种抑制剂存在的条件下,仍可实现高效 qPCR 扩增反应
通过在反应体系中添加多种已知的PCR 抑制物(如全血及其他生物体液,最终浓度为20%)进行测试,评估反应效率。结果显示,抗抑性 qPCR预混液(MDX013) 在多种常见抑制物存在的条件下,反应效率依然保持在90–110% 的理想范围内,体现出其优异的抗抑制性能。
全血样本
Amplification Plot A
Amplification Plot B
40.0
32.0 34.0 36.0 38.0
30.0
28.0
Amplification Plot C
26.0
对含有GC%(A)25%(B)46%和 (C)64%全血样本使用抗抑性qPCR预混 液( 绿色 )和其他对照试剂R( 红色 ) 和T( 蓝色 )进行扩增。
20%
10%
1%
血液比例
使用MDX013( 绿色 )与其他品牌试剂 进行对比,对1%至20%全血样本直接 检测GC含量高达64%的DNA。结果显 示,MDX013在高GC区段和高抑制背景 下依然表现出稳定可靠的扩增性能, 优于市场上其他同类产品。
牛奶、尿液和脊髓液样本
Amplification Plot
Amplification Plot
Amplification Plot
脊髓液
尿液
牛奶
将基因组DNA进行10倍系列稀释后,分别加入脑脊液、人尿液或牛全脂乳中,并使用MDX013( 绿色 )与供应商R的试剂( 红色 )进行扩增对 比。结果显示,MDX013在所有三种样本类型中均展现出更高的灵敏度,能够检测到更低浓度的DNA,并保持更优的扩增效率,明显优于供应商 R的体系。
抗抑性RT-qPCR 预混液 • 专为粗样本直接扩增设计,无需复杂或耗时的提取步骤 • 4 x 预混液,支持更大样本加样体积,提高检测灵敏度 • 单管一步法,仅需加入引物、探针和临床样本即可反应 • 支持冻干(Lyo-ready),可与引物和探针共同冻干, 开发常温稳定的检测体系 • 适用于RNA和DNA病原体的单重或多重检测
产品
产品编号 体积 反应数
5 mL
1,000个反应
抗抑性RT-qPCR 预混液4x
MDX016
50 mL
10,000个反应
5 mL
1,000个反应
抗抑性RT-qPCR预混液 Low-ROX, 4x
MDX105
50 mL
10,000个反应
5 mL
1,000个反应
可冻干抗抑性RT-qPCR 预混液 4x
MDX185
50 mL
10,000个反应
抗抑性RT-qPCR预混液对来自临床样本中的PCR抑制剂表现出高耐受性
唾液样本
10% 唾液
20% 唾液
在分别含有10%或20%的唾液拭子(COPAN ESwab 359C)中加入甲型流感 病毒,分别使用MDX016( 红色 )和常规RT-qPCR预混液( 黑色 )扩增。结 果显示,MDX016相较于标准体系具有更早的Ct值(提前约4个循环)以及更 高的荧光信号(提升约50%),充分体现出其在含有唾液拭子保存液 (UTM)样本中,对病毒RNA检测的卓越抗抑制能力与更高灵敏度。
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痰液样本
将灭活流感病毒加入含有5%人工痰液或无痰的样本中进行扩增测试。结果显示, 抗抑性RT-qPCR预混液(MDX016, 红色 )在5%痰液存在下的扩增曲线,与其在 无痰样本中的表现( 蓝色 )几乎一致,灵敏度和扩增效率未受影响。相比之下,常 规RT-qPCR预混液( 黑色 )在含痰样本中的扩增性能明显下降,灵敏度大幅降低, 显示出 MDX016 在高抑制背景下的显著优势。
1.25% 痰液
2.5% 痰液
5% 痰液
将灭活流感病毒加入不同浓度的人工痰液样本中(1.25%–5%),使用MDX016( 红色 )与常规RT-qPCR体系( 黑色 )进行扩增比较。 结果表明,MDX016对人工痰液中抑制物具有更强的耐受性,在多种痰液浓度条件下依然保持稳定、高效的扩增性能,明显优于标准 RT-qPCR Mix(参考文献Kirchner, S. 等, J Vis Exp (64), 2012)。
粪便样本
腺病毒
诺如病毒 GII
空肠弯曲菌
轮状病毒 A
将4种病原体(RNA病毒:诺如病毒、轮状病毒;DNA病原:腺病毒、 空肠弯曲菌 )混合加入不同浓度的粪便提取物:5%( 黄色 )、 10%( 红色 )、20%( 黑色 )中,使用MDX016进行多重扩增检测。结果显示,即使在最高达20%的粪便基质存在下,MDX016仍可实现稳定、 准确的多重扩增,充分展现其在高抑制背景下的强大兼容性与多重检测能力。
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