高性能 DNA 聚合酶 选择正确的酶原料对分子诊断检测的成功至关重要。在Meridian迈迪安，我们的科学家团队致力于开发最 先进的分子酶，最大限度地提高检测效率、可靠性和准确性。我们专注于提高精确度和性能，不断改进技 术，旨在分子检测提供高性能的诊断原料。
高性能分子酶指南 用于PCR & 等温扩增
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选择合适的分子酶是分子诊断检测成败的关键。 迈迪安的科学研发团队致力于开发最先进的分子酶，最大 限度地提高检测效率、可靠性和准确性。我们专注于精 准度和高性能，不断创新以赋能新一代分子检测。
DNA聚合酶是PCR（聚合酶链反应）检测中DNA扩增的核心酶，广泛用于测序、基因分型、病原体检测及定量等应用中。DNA聚合酶有多种类 型，每种都有不同的特性，包括热稳定性、特异性、持续合成能力、保真度、校对率和延伸性。这些聚合酶可以提取自不同的生物体，如细 菌、古生菌、真核细胞和病毒，经过数十亿年的进化后依然具有其来源生物体特有的专门功能。取决于分子检测的类型，某些DNA聚合酶的特 性是特别需要的，而其他的特性可能不是特别重要，因此选择正确合适的分子酶对开发成功的分子检测至关重要。 DNA聚合酶
DNA 聚合酶影响检测性能的5 大关键标准：
• 特异性： 指DNA聚合酶准确、特异地扩增特定目标DNA序列的能力。特异性是确保扩增过程产生所需的 DNA产物，并尽量减少非特异性或非 目标产物产生的关键因素。 • 持续合成能力： 指酶在与模板结合过程中可添加的核苷酸数量。DNA聚合酶表现出的合成能力体现了反应合成速度、以及对底物分子的亲和 力。持续合成能力强的DNA聚合酶可以扩增更长的DNA模板、二级结构复杂的序列或GC含量高的序列。 • 热稳定性： 指DNA聚合酶在反应的温度循环中承受高温并保持酶活性的能力。如果DNA聚合酶变性或失去活性，扩增就无法进行。 • 保真性： 指聚合酶在PCR过程中插入正确核苷酸的能力。高保真DNA聚合酶具有校对或 3’→5’ 外切酶活性，可纠正DNA复制过程中出现的错 误，提高DNA序列复制的准确性。 • 成本： 医疗保健的可及性依赖于经济有效的诊断解决方案。大规模生产DNA聚合酶的能力更有助于检测开发人员实现其成本目标。 随着科学技术和分子生物学技术的发展，不断出现新的解决方案来提高检测的特异性和灵敏度。热启动酶，包括抗体、化学或适配体修饰的酶， 可检测低丰度DNA靶标，在减少非特异性扩增、提高PCR特异性和灵敏度方面发挥着重要作用。热启动酶能确保DNA合成在特定、可控的温度下 开始，因此可提高DNA扩增的特异性和效率，并提高PCR反应的一致性。 虽然所有热启动修饰酶的活性在室温下都受到了抑制，但它们之间存在 一些关键性的差异：
热启动技
优势
局限
产品
• 酶在室温下失去活性 • 无动物源成分
MDX009 Low DNA Taq HS
化学修饰
• 聚合酶在高温下需要更长的激活时间
• 激活时间短 • 通过阻止过早出现酶活，提供高特异性、一致 性和可重复的扩增 • 无需激活 • 不 含动物源成分 • 酶激活可逆化，在特定温度条件下可选择性释 放酶
• 抗体可能来自动物源 • 反应中外源性蛋白（即抗体）含量较高
MDX008 Taq HS DNA Polymerase
抗体修饰
• 配置好的反应体系不宜在常温下摆置过长时间 • 可能无法很好地与低熔点引物配合使用（因为 活化温度低且可逆）
适配体 修饰
MDX015 Aptamer Taq HS (Glycerol-Free)
DNA聚合酶
标准 & 热启动 Taq DNA聚合酶
Taq DNA聚合酶来自嗜热菌 Thermus aquaticus ，是常用于PCR反应的热稳定酶。迈迪安的Taq DNA聚合酶设计用于对复杂模板进行快速灵敏扩增 的PCR，有多种热启动形式可供选择，包括抗体修饰、化学修饰和适配体修饰。同时提供了与酶搭配使用的优化缓冲液，包含了核苷酸、MgCl 2 和 增强剂的先进优化配方，可用于强效扩增和快速循环条件，大大缩短反应时间，而不会影响PCR的灵敏度或产量。热启动酶还能确保反应在PCR设 置过程中保持完全无活性，以防止非特异性扩增。
特异性： 使用抗体热启动Taq DNA聚合酶进行高灵敏和高特异扩增，可检测低至1个拷贝的模板
使用含有抗体热启动Taq DNA聚合酶（MDX008）的Air-Dryable™可风干血液直扩 qPCR预混液对10%人体血浆样本检测表皮生长因子受体外显子19（EGFR_EX19）突 变。结果显示，在10,000个拷贝的表皮生长因子受体外显子19野生型（EGFR_EX19 Widetype）存在时，能特异、灵敏地检测出单个表皮生长因子受体外显子19缺失的突 变靶标（EGFR_EX19 Deletion）。
EGFR_EX19 Deletion | EGFR_EX19 Widetype
热稳定性： 在常温下稳定长达1个月，方便储运和生产处理
A)
B)
C)
4 ℃ | 室温
使用含有抗体热启动Taq DNA聚合酶（MDX008）的Air-Dryable™ 可风干唾液直扩qPCR预混液对三种不同浓度的靶标 A）g-actin， B）b2mg 和 C）GAPDH DNA进行三重扩 增。在4°C（ 蓝色 ）和室温（ 红色 ）下保存一个月后，检测Taq HS DNA聚合酶（MDX008）的稳定性。结果表明，即使在室温下保存一个月，Taq HS DNA聚合酶的稳定性也不 会受到影响，其功能活性没有丧失，这一稳定性不仅有利于生产过程，而且便于运输和处理。
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DNA 聚合酶
无甘油Taq DNA聚合酶
无甘油聚合酶在活性和稳定性方面具有优势，是开发常温稳定测定的理想选择。迈迪安的无甘油Taq HS聚合酶（MDX011）是一种高浓度酶 （50 U/ μ L）经过优化可在不含甘油的情况下进行强效扩增。该酶的高浓度形式非常适合检测的优化和酶滴定。此外，迈迪安的无甘油Taq HS DNA聚合酶还能兼容于风干或冻干等干燥技术。
可兼容冻干： 无甘油 Taq 聚合酶冻干后具有相同的效率和灵敏度
“
无甘油热启动聚合酶与冻干 兼容，不会降低灵敏度和速度 ”
液体体系 | 冻干体系
使用无甘油Taq HS DNA聚合酶 50U/μL（MDX011）的液体体系（ 黑色 ）或冻干体系（ 蓝色 ）对10倍连续稀释人类DNA（1,000个拷贝至10个拷贝）进行扩增，结果显示冻干 干燥不会影响无甘油Taq HS DNA聚合酶的性能。
高保真 PfuDNA聚合酶
Pfu是一种高保真抗体介导的热启动DNA聚合酶，来自嗜热菌 Pyrococcus furiosus （Pfu)。Pfu聚合酶具有 5´→3´ DNA聚合酶活性和 3´→5´外切 酶活性（校对性能），因此在DNA聚合过程中出现的碱基错配能被校对活性及时纠正。迈迪安的高保真Pfu聚合酶纠错率为3.0 x 10 -6 ，可产生产 生钝端扩增子。该聚合酶还搭配提供含有核苷酸、增强剂和MgCl 2 的先进优化缓冲液，非常适合目标富集、NGS文库扩增或克隆等应用。
高保真性： Pfu 的校对活性可实现准确的 NGS 文库扩增
“
Meridian 迈迪安的高保真 Pfu聚合酶具有 3.0 x 10 -6 纠错率 ”
使用 大肠杆菌 DNA创建了四个NGS文库。文库使用高保真Pfu（MDX003）扩增，然后放入流动池中测序。图中显示了每个样本的唯一映射（只映射到参考序列的一个位置）、 模糊映射和未映射读数占样本读数总数的比例。结果表明，与参考序列比对，使用高保真Pfu聚合酶对 大肠杆菌 DNA的文库的扩增可达到90%以上的准确度。
等温扩增聚合酶
Bst DNA聚合酶
Bst DNA聚合酶是 嗜热脂肪芽孢杆菌 DNA聚合酶的简称, 这是一种常用于等温DNA扩增的聚合酶，例如环介导等温扩增（LAMP)、等温螺旋酶依赖性 扩增（HAD）和等温多重交叉置换扩增（MCA)。迈迪安的Bst DNA聚合酶具有快速的5´- 3´DNA聚合酶活性和强大的链置换活性，可提供快速扩增 （更短反应时间TTR）、高产量、耐盐性和高灵敏度。
快速： Bst DNA聚合酶具有超快反应速度和高特异性
兼容冻干： 无甘油Bst 聚合酶比含甘油的酶具有更快反应速度 （更短TTR）
Meridian Bst Polymerase | NEB Bst 2.0 | NEB Bst
Meridian Bst Polymerase | NEB Bst 2.0 | NEB Bst | ArcticZymes
使用迈迪安的Bst聚合酶（ 红色 ）、NEB Bst 2.0（ 紫色 ）和NEB野生型Bst大片段 （ 绿色 ）对人类病原寄生虫（Strongyloides stercoralis）进行扩增。
使用迈迪安高浓度无甘油Bst（ 红色 ）、NEB Bst 2.0（ 紫色 ）、NEB野生型Bst大片段 （ 绿色 ）和 ArcticZymes IsoPol DNA聚合酶（ 蓝色 ）对CFTR（囊性纤维化跨膜受体） 在相同反应条件下进行检测。
基于核酸序列的扩增（NASBA）是另一种等温扩增技术，它使用三种酶（逆转录酶、RNase H 和 T7 RNA 聚合酶）在41°C温度下直接扩增RNA目标 序列。迈迪安提供NASBA酶的全套解决方案，可直接从RNA靶序列进行快速、灵敏的等温扩增。这些酶不含甘油，与冻干兼容，可用于开发常温稳 定的检测，是POC检测的理想选择。 NASBA Enzymes 快速： 迈迪安的NASBA酶检测具有高特异性，1小时内检 测到靶标 灵敏度： 使用迈迪安的NASBA酶进行灵敏检测，对最低10个 拷贝的RNA靶标可在1小时内完成高效扩增
HIV-1 RNA
0 10 20 30 40
1000 copies 100 copies 1000 copies
100 copies 10 copies
10 copies
使用无甘油T7 RNA聚合酶（HC）（MDX201）、无甘油RNase H（HC） （MDX202）和AMV逆转录酶，在NASBA反应中对1,000个拷贝的HIV-1 RNA靶标进 行扩增。 HIV-1 RNA | NTC
HIV-1 RNA 在NASBA反应中分别对1,000、100和10个拷贝的HIV RNA靶标序列进行高效扩增。
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逆转录酶
MMLV-RT
逆转录酶是从RNA模板合成互补DNA链（cDNA）过程中的必需试剂。它的主要作用是指导第一链cDNA的合成，然后可直接作为PCR，qPCR， LAMP或测序等检测的模板。迈迪安提供了几种不同的逆转录酶，每种都有独特的产品特性，例如高温稳定性或可用于开发常温稳定检测的冻干 兼容性。
一步法 RT-qPCR/ RT-LAMP
两步法 RT-qPCR/ RT-LAMP
详情可参考产品选择表：
热稳定性
产品名称/特点
浓度
产品编号
55C MMLV-RT 兼容冻干或风干
MDX117
高达 60°C
200 U/ µ L
RNase-Tolerant MMLV-RT 含有RNA酶抑制剂可提高反应效率
MDX043
高达 50°C
100x
MMLV-RT RNase H活性较低
MDX044
100x
高达 45°C
Lyo-Compatible MMLV-RT 无甘油配方
MDX042
100x
热稳定性： 迈迪安的55C MMLV-RT在高达60°C的温度下具 有更好的稳定性
灵敏度： 迈迪安的可冻干MMLV-RT 对低拷贝RNA靶标进行 高灵敏度检测
肝炎病毒 RNA | NTC
55C MMLV-RT | MMLV-RT | SuperScript III Reverse Transcriptase
迈迪安的55C MMLV-RT（ 红色 ）、标准MMLV-RT（ 灰色 ）和SuperScript III 热稳定逆 转录酶（Thermo， 黑色 ）分别在40°C-70°C热浴10分钟后，用于多重一步法RT-qPCR 检测，对比稳定性能。Δct值与相同酶在-20℃下产生的ct值进行比较计算。结果显 示，与其他MMLV-RT酶相比，迈迪安的55C MMLV-RT的热稳定性有所提高，并能在 60°C以下的温度下高效合成cDNA。
可冻干MMLV-RT（MDX042）与Lyo-Ready™ 可冻干qPCR预混液（MDX021）一起使 用时，可高效检测肝炎病毒RNA，实现对低拷贝数目标（少至5个病毒颗粒）的高灵敏 度检测。
订购信息
产品
产品编号
标准 & 热启动Taq聚合酶 Taq DNA聚合酶
MDX001
MDX008
Taq HS DNA聚合酶（抗体修饰）
MDX015
无甘油Aptamer Taq HS（适配体修饰)
MDX009
Low DNA Taq HS 5 U/μL（化学修饰) 无甘油 Taq DNA聚合酶 无甘油 Taq HS 聚合酶，50 U/μL
MDX011
高保真 PfuDNA聚合酶 高保真 Pfu 聚合
MDX003
MDX203
无甘油高保真 Pfu 聚合酶（HC）
Bst DNA聚合酶 Bst DNA聚合
MDX012
MDX018
高浓度无甘油Bst 聚合酶（100 U/μL） NASBA 酶 无甘油 T7 RNA 聚合酶（HC, 1,000 U/ µ L）
MDX201
无甘油 RNase H（HC, 50 U/ µ L)
MDX202
MDX209
无甘油 AMV 逆转录酶（HC)
MMLV-逆转录酶 55C MMLV-RT
MDX117
MDX042
可冻干 MMLV-RT
MDX043
RNA酶耐受 MMLV-RT
MDX044
MMLV-RT
MDX209
AMV-RT
其他产品
MDX046 MDX049 MDX047 MDX048 MDX059 MDX068 MDX069 MDX026 MDX027
MDX034 MDX033 MDX075 MDX022 MDX076 MDX007 MDX054 MDX056 MDX051 MDX058
dATP, 100mM （锂盐） dTTP, 100mM （锂盐） dCTP, 100mM （锂盐） dGTP, 100mM （锂盐） dUTP, 100mM （锂盐）
1-Step qPCR 缓冲液， 4x Fast qPCR 缓冲液， 4x 抑制性 qPCR 缓冲液 5x
Lyo-Ready ™ 可冻干 qPCR 缓冲液 2.5x
Bst 反应缓冲液 10x Taq 稀释 缓冲液
VLP-RNA Extraction Control Red VLP-RNA Extraction Control Orange qPCR Extraction Control Red qPCR Extraction Control Orange
Uracil DNA Glycosylase
RNA 酶抑制剂
dNTP Mix, 100mM （锂盐） dNTP Mix, 50mM （锂盐）
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About Meridian 关于迈迪安
Meridian BioScience迈迪安生物科技（中文简称：迈迪 安）是一家全球整合型生命科学公司，专注开发、生产、销 售和分销各种创新诊断产品和关键原材料。我们致力于开发 和提供更好的解决方案，以快速、准确和简便的方式提供答 案，重新定义从发现到诊断的生命可能性。 作为迈迪安的生命科学部门，我们专注于为免疫和分子检测 制造商提供用于人类、动物、植物和环境应用检测的上游原 料，包括抗原、抗体、阻断剂、分子酶、核苷酸以及用于 qPCR和等温扩增应用的优化预混液，旨在简化检测开发，提 高检测性能。 我们的宗旨是为检测开发商提供所需的解决方案--从针对寨 卡和新冠等重大疾病的新型抗原和抗体，到开创市场的创新 型风干 qPCR/RT-qPCR 预混液。我们为能向客户提供卓越的 优质产品、技术支持和客户服务而感到自豪。
订购信息 Meridian Life Science, Inc. Sara Zhou Sales Manager，China 手机：+86-010-8566 0600 邮件：info.cn@meridianlifescience.com 丁香通店铺：meridianlifescience.biomart.cn www.MeridianBioscience.com/lifescience
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